DPBS vs PBS
A PBS vagy foszfáttal pufferolt sóoldat és a Dulbecco foszfátpufferolt sóoldat (DPBS) pufferelt sóoldatok, amelyeket biológiai vizsgálatok során használnak. A PBS-t és a DPBS-t a sejteket érintő kutatásokban használják. Az oldat ionkoncentrációja és ozmolaritása izotóniás, vagyis összeegyeztethető az emberi testtel. A puffer megkönnyíti a 7,2-7,6 stabil pH elérését és megőrzését.
A PBS és a DPBS között nincs szignifikáns különbség. Mindkettő nátrium-foszfátot, nátrium-kloridot, és szükség esetén kálium-foszfátot és kálium-kloridot tartalmaz. Más készítmények, például a DPBS, tartalmazhatnak vagy nem tartalmazhatnak kalciumot és magnéziumot. A PBS-nek és a DPBS-nek számos alkalmazása van, mivel nem ártalmasak a sejtekre. Mind a PBS, mind a DPBS felhasználható a sejtekkel szennyezett műszerek vagy tartályok öblítésére. Ezenkívül mindkettő felhasználható hígító anyagokhoz. Az olyan hígítószerben lévő vízmolekulákat, mint a fehérje, megállítják és kiszárítják. Az anyaggal kombinált víz megakadályozza az anyagot konformációs változásokon, például denaturáción. A kalcium- és magnéziumoldatok korlátozhatják a tripszin aktivitását. Ellipszometriában a fehérje adszorpcióját mérhetjük egy bázisspektrum meghatározásával PBS alkalmazásával.
A foszfáttal pufferolt sóoldat olyan adalékanyagokkal, mint például az EDTA használható a kötegelt sejtek elválasztására. Kicsapódás alakul ki, amikor a cink, egy kétértékű fém, hozzáadódik a PBS-hez, ezért nem adható hozzá a leválasztott sejtekhez. Az ilyen típusú helyzetekben a cink helyett a jó puffert használják.
A foszfátpufferolt sóoldatot és a Dulbecco foszfátpufferolt sóoldatát számos módon állítják elő. Az előállítás egyik módja a 800 g feloldása. nátrium-klorid, 20 g. kálium-klorid, 2 molekula víz, 24 g. kálium-foszfát és 144 g. nátrium-foszfát 8 liter desztillált vízben. Az eredmény 10 liter 10x PBS. Pufferolt oldatok készítésekor közvetlenül mérje meg a PBS pH-ját egy pH-mérővel. Az oldat pH-ját nátrium-hidroxiddal vagy sósavval állíthatjuk be. Foszfáttal pufferolt sóoldatot készítünk hígítószerként 10 mM foszfát, 137 mM nátrium-klorid, 2,7 mM kálium-klorid és 7,4 pH végkoncentrációjával. Fritsch, Sambrook és Maniatis megvan a maga módja pufferoldatok készítéséhez „Molecular Cloning” című könyvükben. Ennek megfelelően egy liter 1x PBS-ben kezdjük el az előkészítést 800 ml-rel. desztillált víz. Tegyen bele 8 g-ot. nátrium-klorid és 0,2 g kálium-klorid. 1,44 g. Ezután hozzáadunk 0,24 g nátrium-foszfátot, majd ezt követően. kálium-foszfát. Tegyünk sósavat, hogy a pH-t 7,4-re állítsuk. Ha 1 liter PBS-t akar előállítani, adjon hozzá még desztillált vizet, amíg 1 literre nem melegszik. Dobja ki a kapott oldatot egy alikvot részre, és az autokláv segítségével sterilizálja az oldatot. Állítsa az autoklávot 121 ° C-ra, és folyadékciklusa alatt 20 percig autoklávba helyezze. Ezután az oldatot szobahőmérsékleten tárolja.
Noha a foszfátpufferolt sóoldatot és a Dulbecco foszfátpufferolt sóoldatát sokféle módon készítik, a tartalom továbbra is ugyanaz. Ezért, függetlenül az előkészítés módjától, az eredmények és a felhasználás továbbra is azonosak.
Összefoglaló:
Az 1.PBS vagy foszfáttal pufferelt sóoldat és a Dulbecco foszfátpufferolt sóolaj (DPBS) pufferelt sóoldatok, amelyeket biológiai vizsgálatok során használnak.
2.A megoldás ionkoncentrációja és ozmolaritása izotóniás, vagyis összeegyeztethető az emberi testtel. A puffer megkönnyíti a 7,2-7,6 stabil pH elérését és megőrzését.
3.A PBS és a DPBS között nincs szignifikáns különbség. Mindkettő nátrium-foszfátot, nátrium-kloridot, és szükség esetén kálium-foszfátot és kálium-kloridot tartalmaz. Más készítmények, például a DPBS, tartalmazhatnak vagy nem tartalmazhatnak kalciumot és magnéziumot.
4.A mindkét PBS és a DPBS felhasználható a sejtekkel szennyezett eszközök vagy tartályok öblítésére. Ezenkívül mindkettő felhasználható hígító anyagokhoz. Az olyan hígítószerben lévő vízmolekulákat, mint a fehérje, megállítják és kiszárítják. Az anyaggal kombinált víz megakadályozza az anyagot konformációs változásokon, például denaturáción. A kalcium- és magnéziumoldatok korlátozhatják a tripszin aktivitását. Ellipszometriában a fehérje adszorpcióját mérhetjük egy bázisspektrum meghatározásával PBS alkalmazásával.
5. A foszfáttal pufferolt sóoldat olyan adalékanyagokkal, mint például az EDTA használható a kötegelt sejtek elválasztására. Kicsapódás alakul ki, amikor a cink, egy kétértékű fém, hozzáadódik a PBS-hez, ezért nem adható hozzá a leválasztott sejtekhez. Az ilyen típusú helyzetekben a cink helyett a jó puffert használják.
A 6.PBS és a DPBS számos módon készül. Noha a foszfátpufferolt sóoldatot és a Dulbecco foszfátpufferolt sóoldatát sokféle módon készítik, a tartalom továbbra is ugyanaz. Ezért, függetlenül az előkészítés módjától, az eredmények és a felhasználás továbbra is azonosak.