Különbség a Bradford és az Lowry Protein assay között

Az kulcs különbség A bradford és az lowry protein assay között ez az A Bradford protein assay a Coomassie briliáns kék G-250 festék abszorbancia eltolódásán alapul, míg a Lowry protein assay a rézionok (Cu +) ionok reakcióján alapul, amelyeket peptidkötések folin-Ciocalteu reagenssel történő oxidációjával állítanak elő..

A teszt olyan analitikai módszer, amely segít meghatározni a minta főbb funkcionális összetevőit. Ezért egy assay kvalitatív vagy kvantitatív teszt lehet. Számos terület, beleértve a laboratóriumi gyógyszert, a farmakológiát, a környezeti biológiát, a molekuláris biológiát, a biokémiát és az immunológiát, rutinszerűen használja ezeket a vizsgálatokat. A Bradford és Lowry protein assay két biokémiai vizsgálat, amelyek meghatározzák a mintaoldat fehérjekoncentrációját. Mindkét teszt kolorimetrikus technikákat alkalmaz az eredmények biztosítására.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a Bradford protein esszé?
3. Mi az a Lowry protein esszé?
4. hasonlóságok a Bradford és az Lowry Protein Assay között
5. Side by side összehasonlítás - Bradford vs Lowry protein esszé táblázatos formában
6. Összegzés

Mi a Bradford protein esszé??

A Bradford protein assay egy gyors spektroszkópos analitikai eljárás fehérje analízishez. Nagy pontosságot mutat az oldatban lévő fehérjekoncentráció mérésekor. Marion Bradford 1976-ban vezette be ezt az eljárást. Ebben a vizsgálatban a teljes reakció a mért fehérjék aminosav-összetételén alapul. Más szóval a Bradford protein assay egy kolorimetrikus assay. A Coomassie ragyogó kék festéket használja. Ezért ez a kolorimetrikus fehérjevizsgálat a festék abszorbancia eltolódásától függ. A Coomassie briliáns kék G-250 három formátumban létezik: kationos (piros), anionos (kék) és semleges (zöld). Savas körülmények között a festék piros formája kékre vált. Megerősíti a fehérje kötődését. Ha nincs fehérje, az oldat barna színű maradhat.

01. ábra: Bradford protein assay

A Bradford protein assay különbözik a többi protein assay-től, mivel kevésbé érzékeny a protein oldatban lévő különböző kémiai vegyületek interferenciáira. Ezek a vegyületek lehetnek nátrium, kálium, glükóz és szacharóz stb.

Mi az a Lowry protein esszé??

Az Lowry protein assay egy biokémiai assay, amelyet az oldatban levő protein összes szintjének meghatározására használnak. Oliver H. Lowry az a személy, aki 1940-ben kifejlesztette ezt a reagenst. Az eljárás az oldat teljes fehérjekoncentrációját egy színváltozással ábrázolja, amely arányos az oldatban található fehérjekoncentrációval. Ezért ez egy kolorimetrikus fehérjevizsgálat is.

Ennek az eljárásnak a alapja a peptidkötések és a Folin-Ciocalteu reagens oxidációjával előállított rézionok (Cu +) közötti reakció. Ez a reagens továbbá foszfomolibdénsavat és foszfor-volfrámsavat tartalmaz. Az Lowry protein-teszt reakciómechanizmusa azonban nem jól ismert. Ez magában foglalja a cisztein, triptofán és tirozin maradványok oxidálását a Folin-Ciocalteu reagens redukciójával.

22. ábra: Lowry protein assay

A ciszteinmaradékok hozzájárulnak a Lowry protein assay-ben megfigyelt abszorpcióhoz, és a reakció briliáns kék molekulát eredményez; heteropolisz molibdén kék. Ennek a molekulanak a redukcióját a 660 nm hullámhosszon végzett abszorpcióval mérjük. Ezért a cisztein és a triptofán maradékanyagok azon koncentrációja, amely redukálja a Folin-Ciocalteu reagenst, kiszámítja az oldatban levő fehérje összkoncentrációját.

Milyen hasonlóságok vannak a Bradford és az Lowry Protein Assay között??

• A Bradford és Lowry fehérje vizsgálatok meghatározzák az oldat fehérjekoncentrációját.
• Mindkét módszer kolorimetrikus módszer.
• Ezenkívül mindkét módszer érzékenysége magas.

Mi a különbség a Bradford és az Lowry Protein Assay között??

A Bradford és a Lowry protein assay kétféle típusú vizsgálat, amely meghatározza az oldatban a fehérjekoncentrációt. A Bradford protein assay a Coomassie briliáns kék G-250 festék abszorbanciájának eltolódására támaszkodik, míg a Lowry protein assay a peptidkötések oxidációjával előállított rézionok reakciójától függ a Folin-Ciocalteu reagenssel. Szóval, ez a legfontosabb különbség a Bradford és az Lowry protein assay között. A Bradford protein assay 15 percig tart, míg az Lowery protein assay 40-60 percet vesz igénybe. Tehát ez egy másik különbség a Bradford és az Lowry protein assay között. Ezenkívül a Bradford protein assay függ az aminosav összetételtől, míg a Lowry protein assay részben az aminosav összetételtől függ. Ezért ez a különbség a Bradford és a Lowry protein assay között is.

Az inforaphic alatt további részleteket talál a Bradford és az Lowry protein assay közötti különbségről.

Összegzés - Bradford vs Lowry protein esszé

Az assay analitikai technika, amelyet a minta fő funkcionális komponensének jellemzésére használnak. A Bradford és Lowry protein assay kétféle protein assay, amelyek kolorimetrikus technikákkal működnek. Mind a Bradford, mind az Lowry fehérjevizsgálat meghatározza az oldatban a fehérjekoncentrációt. A Bradford és az Lowry Protein Assay közötti fő különbség azonban az általuk alkalmazott kolorimetrikus technikán alapul. A Bradford protein assay a Coomassie briliáns kék G-250, míg a Lowry protein assay rézionokat (Cu +) és Folin-Ciocalteu reagenst használ. Ezenkívül a Bradford-módszer gyors eredményeket ad, mint az Lowry protein assay. Ugyanakkor mindkét módszer nagyon érzékeny módszer, és különböző anyagok befolyásolhatják őket.

Referencia:

1. „Canadian Journal of Botany”. Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, elérhető itt.
2. “A fehérjevizsgálatok kémiája.” Thermo Fisher Scientific - USA, elérhető itt.

Kép jóvoltából:

1. „Bradford protein assay” - Helito - Saját munka (CC BY-SA 4.0) a Commons Wikimedia segítségével