A kolóniaképző egység (CFU) és a legvalószínűbb szám (MPN) két módszer a mikroorganizmusok felsorolására a mintákban. Mindkét paramétert a vízminőség és a széklet indikátor baktériumok kimutatására használják a vízmintákban. A kolóniát alkotó egység az az életképes baktériumsejt vagy gombás sejt számának felmérésére szolgál, amely egy adott minta meghatározott térfogatában vagy tömegében található. Ehhez a paraméterhez a standard egység CFU / ml vagy CFU / g. A legvalószínűbb szám egy másik egység, amely a folyékony mintában az életképes baktériumsejtek számának mérésére szolgál. A legfontosabb különbség a CFU és az MPN között az A CFU kiszámítása a szilárd agarlemezen növekvő baktérium- és gombás kolóniákból történik míg Az MPN kiszámítása folyékony közegben növekvő életképes baktériumok alapján történik.
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a CFU?
3. Mi az MPN?
4. Side by side összehasonlítás - CFU vs MPN táblázatos formában
5. Összegzés
Kolóniaképző egység (CFU) egy olyan paraméter, amely megméri az életképes baktérium- vagy gombás sejtek számát egy adott mintában. A kolóniaképző egységek számlálására szolgáló módszert nevezzük standard lemezszám. Az agarlemezeken megjelenő életképes kolóniákat CFU-ként fejezzük ki a folyadékok mintájának 1 ml-ére (kolóniaképző egység / ml) vagy CFU-ra / szilárd anyagok mintájának 1 g-jára (kolóniát alkotó egység / gramm).
Két közös módszer van a CFU mérésére egy mintában. Ők szórótányér módszer és önts tányér módszer. Ezt a két módszert egy soros hígításnak nevezett technika támogatja. A sorozatosan hígított minták megszámlálható számú telepet eredményeznek az agar felületén. Az ismert mennyiségű minta eloszlatható egy agarlemez felületére, vagy agarral összekeverhető és egy lemezen önthető. A lemezt ezután inkubáljuk, és a kialakuló telepeket megszámoljuk. A telepek száma az eredeti mintában levő mikroorganizmusok számához kapcsolódik. Azokat a lemezeket, amelyek túl sok vagy túl kevés telepet mutatnak, kizárjuk a számlálásból, mivel az eredmények nem feltétlenül statisztikailag pontosak ezeken a lemezeken. Statisztikai szempontból a legjobb tartomány 30 - 300 kolónia egy agarlemezen. Ezért a pontos lemezezéshez a megfelelő lemezeket kell kiválasztani. A fenti funkcióhoz soros hígítást hajtunk végre.
Miután megszámolta az életképes telepek számát a lemezeken, a CFU / ml kiszámítható a következő egyenlettel.
CFU az eredeti minta ml-jén = a telepek száma a tányér X hígítási tényezőjén
Hígítási tényező = (1 / a lemez hígítása)
Például, ha 149 telepet kap a tálca tányérján-4 hígítás, akkor a baktériumok számát az eredeti mintában 1 ml-ben a következőképpen lehet kiszámítani:
CFU / ml = (149) x (1/10-4)
= 149 × 104 vagy 1490000
= 1,49 x 106
01. ábra: Kolóniaképző egység
Az a legvalószínűbb szám a CFU / ml alternatívája. Az MPN a folyékony minta életképes sejtjeit is becsüli. A folyékony tenyészetben növekvő organizmusokat számolja és túlnyomórészt bakteriológiai módszer. Ez a módszer különösen akkor hasznos, ha a baktériumsejtek alacsony koncentrációban tartalmaznak mintákat; például tej, ivóvíz stb. Az MPN-értéket 100 ml térfogatra fejezik ki. Az MPN a valószínűség elméletén alapuló statisztikai módszerre támaszkodik. Vannak statisztikai táblázatok, amelyek célja az MPN-értékek 100 ml mintára történő meghatározása. Ezek a táblázatok az eredményeket 95% -os megbízhatósági határokon mutatják.
Az MPN-értéket egy többcsöves erjesztési módszernek nevezett eljárás elvégzése után számítják ki. Három, megfelelő tápközeget tartalmazó csőkészletet oltunk be három különböző mennyiségű mintával, például 10 ml, 1 ml és 0,1 ml mintával, és inkubáljuk a növekedéshez. Az inkubációs periódus után a csöveket + (pozitív) vagy - (negatív) pontszámmal határozzuk meg a növekedés jelenléte vagy hiánya szempontjából. A pozitív és negatív eredmények mintáját ezután összehasonlítják egy MPN statisztikai valószínűségi táblázattal a mikroorganizmusok számának becsléséhez. Ezután az MPN értéket meghatározzuk a minta 100 ml-ére. Az MPN-t széles körben használják a vízmintákban található koliform baktériumok kimutatására.
02 ábra: MPN táblázat
CFU vs MPN | |
A CFU egy mérőszám, amely kifejezi az életképes baktérium- vagy gombás kolóniák számát egy adott mintában. | Az MPN a CFU alternatívája és méri az életképes baktériumsejtek számát egy folyékony mintában. |
Mértékegység | |
CFU / ml vagy CFU / g | MPN / 100 ml |
Számítás | |
A CFU kiszámításához az agarlemezeken termesztett telepek számát kell kiszámítani. | Az MPN kiszámításához a csövek pozitív és negatív mintáit összehasonlítják az MPN statisztikai táblázatokkal. |
Soros hígítás technika | |
A soros hígítást elvégezzük, mielőtt a mintákat agarlemezekre helyezzük. | Az MPN kiszámításakor a soros hígítást általában nem hajtják végre |
Mód | |
A szórótányér és az öntőlemez módszer a CFU előállításához kétféle módszer. | A többcsöves erjesztés az az eljárás, amelyet MPN-érték elérésére végeznek. |
A mikrobiális növekedés mérése számos okból szükséges. Az élelmiszer-feldolgozó üzemekben meg kell mérni az élelmiszerekben található mikroorganizmusok szintjét és típusát. Az élelmiszeriparban és az orvostudományban biztosítani kell a sterilizáló kezelések eredményes alkalmazását. A szennyvíztisztító telepekben a mikrobiális számot rutinszerűen kell elvégezni. A molekuláris biológiai eljárás optimalizálásakor meg kell mérni a telepek számát a lemezeken. Ezért különféle felsorolási és növekedési mérési módszerek állnak rendelkezésre. A CFU és az MPN két ilyen módszer, amelyeket széles körben alkalmaznak a különféle területeken. A CFU az életképes bakteriális és gombás kolóniák számának mérése egy adott mintában. A szokásos lemezszámlálási módszerrel vagy életképes lemezszámlálási módszerrel számolják. Az MPN egy másik mérési módszer, amely kifejezi a baktériumsejtek számát a folyékony minta adott térfogatában. Kiszámítása többcsöves erjesztési módszer és MPN táblázat alapján történik. Ez a különbség a CFU és az MPN között.
Letöltheti a cikk PDF verzióját, és offline célokra felhasználhatja, az idézethez fűzött megjegyzések szerint. Töltse le a PDF verziót itt. Különbség a CFU és az MPN között.
- Kolóniaképző egység. Wikipedia. Wikimedia Alapítvány, 2017. május 28. Web. Itt érhető el. 2017. június 1.
“Mikrobiológia - 014 - A legvalószínűbb szám.” Mikrobiológia - 014 - A legvalószínűbb szám | Mikrobiológiai egyetemi program. N.p., n.d. Web. Itt érhető el. 2017. június 1.
1.” Kézi CFU-számlálás ”Quentin Geissmann - Saját munka (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia-on keresztül
2. „OSC Microbio 00 EE MPNTable” a CNX OpenStax által - (CC BY 4.0) a Commons Wikimedia-on keresztül