Különbség a közvetlen és a közvetett immunfluoreszcencia között

Az kulcs különbség közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia között az, hogy a a közvetlen immunfluoreszcencia egyetlen antitestet használ, amely a szóban forgó célpont ellen működik, míg a közvetett immunfluoreszcencia két antitestet használ a szóban forgó célpont jelölésére.

Az immunfluoreszcencia vagy a sejt képalkotó eljárás egy speciális cél antigén fluoroforral történő jelölésére szolgáló technika. Itt a fluorofor egy fluoreszkáló kémiai vegyület, amely fényt gerjeszthet a fény gerjesztésekor. Amikor a fluorofor kötődik a célantigénhez, lehetővé teszi a célmolekula kimutatását a mintában. További leírás céljából, ha egy antigén kötődik egy specifikus ellenanyaghoz, akkor azt fluoroforokkal konjugálhatjuk. Ennélfogva a fluoreszcencia mikroszkóp alatt történő megfigyelés során egyszerűen kimutatható a cél antigén jelenléte a mintában..

Ezen kívül kétféle immunfluoreszcencia létezik; közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia. A közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia közötti különbség elsősorban a felhasznált antitestek számában és a fluorofor-konjugációban rejlik. Vagyis közvetlen immunfluoreszcencia során a fluorofor közvetlenül konjugálódik a primer antitesttel, míg a közvetett immunfluoreszcencia során a fluorofor a szekunder antitesttel konjugálódik.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a közvetlen immunfluoreszcencia?
3. Mi az indirekt immunfluoreszcencia?
4. Közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia hasonlóságok
5. Összehasonlítás egymással - közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia táblázatos formában
6. Összegzés

Mi a közvetlen immunfluoreszcencia??

Az immunfluoreszcencia antitesteket alkalmaz a specifikus cél antigének kimutatására. A közvetlen immunfluoreszcencia az immunfluoreszcencia két típusának egyike. A közvetlen immunfluoreszcencia során egyetlen antitest (primer antitest) magában foglalja, és a fluorofor közvetlenül konjugálódik az elsődleges antitesttel. Az ellenanyagnak a célantigénhez történő kötődésekor a fluorofor fluoreszcenciát bocsát ki, amelyet fluoreszcencia mikroszkóppal detektálhatunk.

01. ábra: Közvetlen immunfluoreszcencia

A közvetlen immunfluoreszcencia azonban drága módszer, mivel az elsődleges konjugált antitestek költségesek a szekunder antitestekhez képest. Ennek ellenére ez nem jár további lépéssel, tehát rövidebb technikával. Ezenkívül a nem-specifikus kötés csökkent a közvetlen immunfluoreszcencia során. Ezért a fajok keresztreaktivitása alacsony. De a detektálás során a közvetlen immunfluoreszcencia érzékenysége gyenge a közvetett immunfluoreszcenciához képest .

Mi az a közvetett immunfluoreszcencia??

Az indirekt immunfluoreszcencia az immunfluoreszcencia második típusa, amely kétféle antitestet foglal magában, például primer és szekunder antitesteket a cél antigén jelölésében. Ebben az eljárásban a fluorofor a szekunder antitesttel konjugálódik. Ezért ez a technika egy további lépést foglal magában.

02 ábra: Immunfluoreszcencia

Ebben az eljárásban azonban az érzékenység magas, mivel több fluorofor konjugálható szekunder antitestekkel, és ez megkönnyíti a detektálást. Ezenkívül a közvetett immunfluoreszcencia olcsóbb, mivel a másodlagos antitestek konjugálása olcsóbb és könnyebb. A közvetlen immunfluoreszcenciával összehasonlítva a fajok keresztreaktivitása magas a közvetett módszernél.

Milyen hasonlóságok vannak a közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia között??

• Kétféle immunofluoreszcencia technika.
• Az elsődleges antitestek és a fluorofor mindkét módszerben részt vesznek.
• Az antigén-antitest reakció mindkét módszernél előfordul.
• Ezenkívül mind a közvetlen, mind a közvetett immunfluoreszcencia fluoreszcencia mikroszkópot használ az antigén kimutatására.

Mi a különbség a közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia között??

Az immunfluoreszcencia közvetlen vagy közvetett lehet az alkalmazott antitestekkel végzett fluorofor-konjugáción alapulhat. Közvetlen immunfluoreszcencia során a fluorofor az elsődleges antitesttel konjugálódik, amely az egyetlen antitest, amelybe beletartozik ez a technika. Ezzel szemben, közvetett immunfluoreszcencia során, a fluorofor a szekunder antitesttel konjugálódik, amely a technika egyik részét képező antitest két típusának egyike. Ennélfogva a közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia közötti fő különbség az antitest típus, amely konjugálódik a fluoroforral.

A következő infographic összehasonlítja a közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia közötti különbséget.

Összegzés - Közvetlen vagy közvetett immunfluoreszcencia

Az immunfluoreszcencia olyan módszer, amelyet a mintában lévő specifikus antigének jelenlétének kimutatására használnak. Ez a technika specifikus antitesteket alkalmaz. Ezért az antitestek konjugálódnak fluoroforokkal, hogy fluoreszcens mikroszkóppal detektálják őket. Ezenkívül kétféle immunfluoreszcencia létezik, nevezetesen a közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia. A közvetlen immunfluoreszcencia egyetlen antitestet és fluorofort tartalmaz, közvetlenül ehhez az ellenanyaghoz konjugálva. A közvetett immunfluoreszcencia két antitestet tartalmaz; primer és szekunder, valamint a szekunder antitesttel konjugált fluorofór. Mivel számos szekunder antitest kötődik egy primer antitesttel és több fluorofor képes konjugálódni a szekunder antitestekkel, az indirekt immunfluoreszcencia érzékenyebb módszer, mint a közvetlen módszer. Ezenkívül a közvetett módszer olcsóbb, mint a közvetlen módszer. Tehát ez a különbség a közvetlen és a közvetett immunfluoreszcencia között.

Referencia:

1. „Immunfluoreszcenciás.” Wikipedia, Wikimedia Alapítvány, 2018. augusztus 19. Elérhető itt 

Kép jóvoltából:

1. „HSP IF IgA” Emmanuelm, az en.wikipedia, (CC BY 3.0), a Commons Wikimedia segítségével
2. „Immunfluoreszcencia” Westhayl618 által - Saját munka, (CC BY-SA 4.0) a Commons Wikimedia segítségével