Az kulcs különbség a gén amplifikáció és a génklónozás között az, hogy a A gén amplifikáció az a kérdéses gén sok példányának előállítása in vitro egy polimeráz láncreakcióval. A génklónozás azonban egy folyamat, amellyel az érdeklődő gén sok példányát elkészítik in vivo rekombináns plazmid előállításával és gazda baktériummá történő átalakításával.
A gén a DNS egy specifikus fragmense, amely fehérjét kódol. Egy szervezet több ezer gént tartalmaz. Ezenkívül a fontos gének DNS-szekvenciáit szorozzuk meg molekuláris biológiai technikák alkalmazásával. A génamplifikáció és a génklónozás két ilyen eljárás. Mindkét eljárás számos másolatot hoz létre az érdeklődésre számot tartó génből. A módszertan szempontjából azonban különbség van a gén amplifikáció és a génklónozás között.
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a génerősítés?
3. Mi a génklónozás?
4. hasonlóságok a gén amplifikáció és a gén klónozás között
5. Összehasonlítás egymással - Gén-amplifikáció vs. génklónozás táblázatos formában
6. Összegzés
A gén amplifikáció egy adott gén másolatainak készítésének folyamata polimeráz láncreakció alkalmazásával. A gén amplifikálásához az adott szervezet DNS-ét megfelelő DNS-extrakciós protokollal kell extrahálni. Ezután az extrahált kettős szálú DNS-t denaturálni kell, hogy különálló szálokat kapjunk. A következő lépés egy PCR reakció felhasználása a szóban forgó gén másolatainak előállítására. Ezenkívül a PCR keverék tartalmaz szükséges primereket, nukleotidokat, DNS polimeráz enzimet, templát DNS-t és egyéb összetevőket. A Kínai Népköztársaság programjának végén megtörténik a kérdéses gén amplifikációja.
01. ábra: Gén amplifikáció
Ezenkívül a gén amplifikáció egy specifikus szekvencia kimutatásának, egy szervezet azonosításának, betegségek diagnosztizálásának és génkönyvtárak készítésének kezdeti lépése..
A génklónozás egy módszer a géntechnikában génkönyvtárak készítéséhez vagy az érdekes gén sok példányának elkészítéséhez. Ez az eljárás magában foglalja egy rekombináns plazmid előállítását és a rekombináns plazmid transzformálását gazdasejtbe, különösen baktériumsejtbe. A klón az eredeti szervezet vagy egy molekula azonos példánya. A génklónozás ezer génklónt eredményezhet.
02 ábra: Génklónozás
Miután azonosítottuk a kérdéses gént, elválaszthatjuk egy adott organizmus genomjáról, korlátozva azt specifikus restrikciós enzimekkel. Ugyanezen restrikciós enzim alkalmazásával a plazmidokat (vektorokat) fel kell nyitni a génfragmens beillesztésére. Ezután a rekombináns plazmidot különböző módszerekkel, például elektroporációval transzformáljuk gazda baktériummá. Néhány rekombináns plazmid bejut a gazda baktériumsejtekbe. Antibiotikum alkalmazásával a transzformált baktériumokat szelektálhatjuk, izolálhatjuk és friss közegekben tenyészthetjük. Tehát ez a technika elősegíti millió génklón előállítását.
A gén amplifikáció egy olyan folyamat, amelynek során egy adott génből másolatokat készítünk in vitro PCR-nek nevezett módszer. Másrészt a génklónozás egy olyan folyamat, amelynek során egy adott génből másolatokat készítünk in vivo módszer rekombináns vektorok felépítésével és szaporításával az élő szervezetben. Szóval, ez a legfontosabb különbség a gén amplifikáció és a gén klónozás között. Ezenkívül a gén amplifikációja csak néhány órát vesz igénybe, míg a génklónozás több napig tart. Ezért ezt a különbséget a gén amplifikáció és a gén klónozás között is tekinthetjük. Sőt, a génamplifikációs folyamat kevesebb hibát mutat, míg a génklónozási folyamat több hibát mutat.
A következő infographic összefoglalja a génamplifikáció és a génklónozás közötti különbséget.
A gén amplifikációja a kívánt gén másolatainak előállítása polimeráz láncreakcióval in vitro körülmények között, míg a génklónozás az érdekes gén másolatainak előállítása rekombináns DNS molekula és élő szervezet / gazda baktérium felhasználásával. Tehát ez az alapvető különbség a gén amplifikáció és a gén klónozás között.
1. „Molekuláris klónozás”. Wikipedia, Wikimedia Alapítvány, 2019. augusztus 2., elérhető itt.
2. “Gén amplifikáció.” Génerősítés - áttekintés | ScienceDirect témák, elérhető itt.
1. „PCR” Madprime által - Saját munka (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével
2. „A molekuláris klónozás lépései”: Alexpicardal97 - Saját munka (CC BY-SA 4.0) a Commons Wikimedia segítségével