Különbség az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között

Főbb különbség - immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia
 

A molekuláris biológiai módszereket alkalmazó betegségdiagnosztika a klinikai laboratóriumi technológia kiemelkedő területévé vált. Ez magában foglalja az összes tesztet és módszert a betegség azonosítására és a betegség okának megértésére, a DNS, RNS vagy expresszált fehérjék elemzésével egy szervezetben. A molekuláris diagnosztika gyors fejlődése lehetővé tette a fertőző és nem fertőző betegségek alapkutatását. Ezeket a betegségben részt vevő kritikus gének vagy fehérjék szekvencia- vagy expressziós szintjének változásainak meghatározására használják. Az immunfluoreszcencia (IF) és az immunhisztokémia (IHC) két ilyen széles körben alkalmazott módszer a rákbiológiában. Az IF az IHC egyik típusa, ahol a monoklonális és poliklonális antitestek elemzésére fluoreszcencia detektálási módszert alkalmaznak, míg az IHC kémiai alapú módszereket alkalmaz a monoklonális és poliklonális antitestek kimutatására. Ez a legfontosabb különbség az IF és az IHC között.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi az immunfluoreszcencia? 
3. Mi az immunhisztokémia?
4. Az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia hasonlóságai
5. Összegzés összehasonlítása - Immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia táblázatos formában
6. Összegzés

Mi az immunfluoreszcencia (IF)?

Az immunfluoreszcencia egy kimutatási technika, ahol a vizsgálatban használt antitesteket fluoreszcens festékek vagy fluoreszcens fehérjék felhasználásával címkézik a detektálás céljából. A címkézett másodlagos antitestek nem kívánt háttérjeleket eredményezhetnek; ezért az IF-technika magát az elsődleges antitestet jelöli azon a ponton, hogy a nemkívánatos jeleket a detektálás során elkerüljék. Ezen a technikán keresztül megakadályozzuk a primer és a szekunder antitest közötti nem-specifikus kötődést, és ez gyorsabb, mivel nincs bevonva másodlagos inkubációs lépés. Az adatminőség szintén javult.

01. ábra: Dupla immunfluoreszcencia festés a BrdU, NeuN és GFAP számára

A fluorkrómok vagy fluoreszcens festékek olyan vegyületek, amelyek képesek elnyelni a sugárzást, előnyösen ultraibolya sugárzást, amely izgatott. Amikor a részecskék az gerjesztett állapotból elérik a talajállapotot, sugárzást bocsátanak ki, amelyet egy detektor fog fel és észlel, és így spektrumot képez. Nagyon fontos, hogy a fluoreszkáló jelölés kompatibilis és stabil legyen az adott reakcióban, és a pontos eredmények elérése érdekében megfelelően konjugálva legyen az antitesttel. Az egyik leggyakrabban használt fluorkróm a fluoreszcein-izotiocianát (FITC), amely zöld színű, abszorpciós és emissziós csúcsainak hullámhossza 490 nm, illetve 520 nm. A rodamin, az IF-ben alkalmazott másik szer vörös színű, 553 és 627 nm abszorpciós és emissziós csúcs hullámhosszaival..

Mi az immunhisztokémia (IHC)?

Az IHC egy molekuláris tesztelési módszer, amelyet az antigén jelenlétének azonosítása és igazolása céljából megcéloznak a célsejtben. A célsejt lehet fertőző részecske, mikrobiális patogén vagy rosszindulatú tumorsejt. Az IHC monoklonális és poliklonális antitesteket alkalmaz a antigének jelenlétének meghatározására a célsejtek sejtfelületén. A technika az antigén-antitest kötődésen alapul. Ezekhez az antitestekhez detektáló markert konjugálunk az adott antigén jelenlétének vagy hiányának kimutatására. Ezek a markerek lehetnek kémiai markerek, például enzimek, fluoreszcensen jelölt antitestek vagy radioaktívan jelölt antitestek.

02 ábra: Egér-agy szelet immunohisztokémiai úton festett

Az IHC legnépszerűbb alkalmazása a rákos sejtbiológiában a rosszindulatú daganatok kimutatására, de fertőző betegségek kimutatására is felhasználható.

Mik a hasonlóságok az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között??

• Az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia in vitro körülmények között zajlik.
• Mindkét módszer az antigén antitestre épül
• Mindkettő nagyon gyors technika.
• A technikák eredményei megismételhetők.
• Mindkettő javította az adatminőséget.
• Ezeket a technikákat használják a rák és a fertőző betegségek diagnosztizálására.

Mi a különbség az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia között??

Immunfluoreszcencia vs immunhisztokémia
Az IF kimutatási technika, ahol a vizsgálatban alkalmazott antitesteket fluoreszcens festékek vagy fluoreszcens fehérjék felhasználásával címkézik.	Az IHC egy detektálási technika, amelynek során a vizsgálatban használt antitesteket vegyi anyagok vagy radioaktív elemek felhasználásával címkézik.
Pontosság
A pontosság nagyobb az IF technikában, mint az IHC.	A pontosság alacsonyabb az IHC-ben.
sajátosság
Az IF pontosabb.	Az IHC kevésbé specifikus.

Összegzés - immunfluoreszcencia és immunhisztokémia

A molekuláris mechanizmusok sok változást hoztak az orvostudomány területén, olyan fejlett molekuláris tesztelési módszereket eredményezve, amelyek forradalmat hoztak a diagnosztika területén. Ezek a találmányok a betegség gyors és pontos azonosításához és megerősítéséhez vezettek, ezáltal lehetővé téve a gyógyszerek sikeres beadását és előállítását. Ezeket a technikákat a gyógyszerészetben is használják a gyógyszerek célpontjainak megtalálása és a gyógyszer farmakokinetikai tulajdonságainak megerősítése érdekében a gyógyszer anyagcseréje során. Az IF és az IHC két olyan diagnosztikai módszer, amelyek az antigén és az antitest-kötés fogalmán alapulnak, bár a detektálási mód mindkét módszernél eltérő. Az IF az antigén kimutatására a fluoreszcencia elvét használja, az IHC pedig a kémiai konjugáció fogalmát használja az antigén kimutatására. Ez a különbség az IF és az IHC között.

Töltse le az immunofluoreszcencia és immunhisztokémia PDF verzióját

Letöltheti e cikk PDF verzióját, és offline célokra felhasználhatja, az idézet megjegyzésének megfelelően. Töltse le a PDF verziót itt. Az immunfluoreszcencia és az immunhisztokémia közötti különbség.

Irodalom:

1. Aoki, Valéria és mtsai. „Közvetlen és közvetett immunfluoreszcencia.” Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, elérhető itt. Belépés 2017. augusztus 25.
2. Duraiyan, Jeyapradha és mtsai. “Az immunhisztokémia alkalmazásai.” A Pharmacy & Bioallied Sciences Journal, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, 2012. augusztus, elérhető itt. Belépés 2017. augusztus 25.

Kép jóvoltából:

1. „Kettős immunfluoreszcencia festés a BrdU, NeuN és GFAP számára”, írta: Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, X fan, Xu G, Frey WH 2., Liu X. - A transzformáló növekedési faktor intranazális bejuttatása - A stroke utáni egerekben a beta1 csökkenti az infarktus térfogatát és növeli a neurogenezist a szubventrikuláris zónában; PMID 19077183 (CC BY 2.0) a Commons Wikimedia-n keresztül
2. „ABC-immunhisztokémiai úton festett egér szövetek hipotalamusa” zabbn által - Saját munka (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével