A rák és a fertőző betegségek diagnosztizálása egy népszerű trend, ahol új proteomikán és genomikán alapuló technikákat alkalmaznak a daganatok vagy fertőző sejtek, azok szaporodásának és a sejtfejlődés helyének azonosítására és a legtöbb fertőző és nem fertőző betegség genetikai alapjának elemzésére. Ennek eredményeként a gyógyszer pontos feldolgozása és megtervezése, valamint a betegségekre szabott terápiák kidolgozása alakul ki. Az in situ hibridizáció (ISH) és az immunhisztokémia (IHC) két ilyen széles körben alkalmazott módszer a rákbiológiában, és az in situ hibridizáció és az immunkémia közötti kulcsfontosságú különbség az elemzési eljárásban használt molekulákban rejlik.. Az ISH-ban a nukleinsav-próbákat használják az elemzésben, míg az IHC-ban a monoklonális és poliklonális antitesteket használják a diagnosztikai meghatározásokhoz.
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi az in situ hibridizáció?
3. Mi az immunhisztokémia?
4. hasonlóságok az in situ hibridizáció és az immunhisztokémia között
5. Összegzés összehasonlítása - In situ hibridizáció vs immunhisztokémia táblázatos formában
6. Összegzés
Az in situ hibridizáció egy nukleinsav hibridizációs technika, amelyet közvetlenül a szövet egy részén vagy szakaszán, az egész szövetben vagy a sejtekben hajtanak végre. A módszer a Watson Crick komplementer bázispárosítás elméletétől függ, vagy olyan DNS-DNS-hibrid vagy DNS-RNS-hibrid eredményezve, amely képes mutáns gének detektálására vagy a szükséges gén azonosítására. Az egyszálú DNS-szekvenciákat, a kétszálú DNS-szekvenciákat, az egyszálú RNS-szekvenciákat vagy a szintetikus oligonukleotidszekvenciákat próbákként használják a hibridizációs technika során, és ezeket a próbakat radioaktív foszformal jelölik az 5'-végén az azonosításhoz az autoradiográfia során, vagy fluoreszcens festékekkel címkézik. . Különböző típusú ISH technikák állnak rendelkezésre, az alkalmazott szonda típusa és az alkalmazott megjelenítési módszer típusa alapján.
01. ábra: Fluoreszkáló helyzet hibridizáció
Az ISH-nak számos alkalmazása van, elsősorban a fertőző betegségek molekuláris diagnosztikájában, a kórokozók jelenlétének azonosítása és a kórokozó molekuláris diagnosztikával történő megerősítése érdekében. Használják a fejlődési biológia, a kariotípus és a filogenetikai elemzés, valamint a kromoszómák fizikai feltérképezésének területén is..
Az IHC technikájában a fő elemzett molekula az antigén. Az IHC során monoklonális és poliklonális antitesteket alkalmaznak az antigének jelenlétének meghatározására fertőzés vagy rosszindulatú sejtek proliferációs státusa esetén. A technika az antigén-antitest kötődésen alapszik, és enzimcímkéket használnak erre a technikára; az egyik ilyen alkalmazás az ELISA (enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat). A markerek fluoreszcensen jelölt antitestek vagy radioaktívan jelölt antitestek is lehetnek.
02 ábra: Immunhisztokémia
Az IHC-t széles körben használják a rákos sejtek kimutatására. A diagnosztikai eljárások a tumorsejteken jelen levő antigéneket célozzák meg a tumor azonosítása és jellemzése céljából. Ugyanezt az eljárást alkalmazzák a fertőző kórokozók diagnosztizálására is. Monoklonális és poliklonális antitesteket is alkalmaznak a különböző géntermékek elemzésére, lehetővé téve az ellenanyag-antigén-kötő reakciót a kívánt fehérje és az alkalmazott szintetikus ellenanyag között.
In situ hibridizáció vs immunhisztokémia | |
Az ISH egy nukleinsav-hibridizációs technika, amelyet közvetlenül a szövet egy részén vagy szakaszán, vagy az egész szövetnél hajtanak végre. | Az IHC olyan módszer, amelyben monoklonális és poliklonális antitesteket alkalmaznak antigének jelenlétének meghatározására, amelyek a sejtfelületekre helyezett speciális protein markerek. |
Az elemzett biomolekulák típusa | |
Az ISH nukleinsavakat elemzi. | Az IHC a fehérjéket-antigéneket elemzi. |
A biokémiai reakció alapja | |
Ebben a technikában a DNS-DNS vagy a DNS-RNS közötti komplementer bázispárosodás történik. | Az antigén-antitest kölcsönhatások részt vesznek az immunhisztokémiában. |
Enzimmel kapcsolt detektálási módszerek | |
Az enzimhez kapcsolt detektálási módszerek nem használhatók az ISH-ban. | Az enzimhez kapcsolt detektálási módszerek alkalmazhatók az IHC-ben. |
A molekuláris diagnosztika gyors és megerősítő módszerek, amelyek felhasználhatók a nem fertőző betegségek, például a rák vagy a fertőző betegség, például a HIV vagy a tuberkulózis azonosítására a sejteken lévő molekuláris markerek alapján, amelyek a betegség megnyilvánulásához vezetnek. A molekuláris markerek jelen lehetnek expresszált fehérjék formájában vagy genetikai szinten, amelyek alapján különféle új technikákat vezetnek be a hatékonyság növelése érdekében, és kevésbé fárasztóak, bár ezeknek a technikáknak a költségei nagy költségekkel járnak. Az ISH tehát a DNS-DNS-től vagy a DNS-RNS hibrid képződésétől függ, az IHC pedig az antitest és az antigén közötti specifikus reakcióktól függ. Ez a különbség az in situ hibridizáció között.
Letöltheti e cikk PDF verzióját, és offline célokra felhasználhatja, az idézet megjegyzésének megfelelően. Töltse le a PDF verziót itt. Különbség az in situ hibridizáció és az immunhisztokémia között.
1. Duraiyan, Jeyapradha és mtsai. “Az immunhisztokémia alkalmazásai.” A Pharmacy & Bioallied Sciences Journal, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, 2012. augusztus, elérhető itt. Belépés 2017. augusztus 24.
2. “In situ hibridizáció (ISH).” Nemzeti Biotechnológiai Információs Központ, Amerikai Egyesült Államok Nemzeti Orvostudományi Könyvtára, elérhető itt. Belépés 2017. augusztus 24.
1. „FISH (fluoreszkáló in situ hibridizáció)”, MrMatze - Saját munka (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével
2. „Immunohistochemicalstaining2” Imoen által az angol nyelvű Wikipedia-ban (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével