Különbség a fúzió és a Taq polimeráz között

Fő különbség - Phusion vs Taq polimeráz
 

A DNS-polimerázokat széles körben használják enzimekként a molekuláris biológiai technikákban, és természetesen megtalálhatók minden olyan szervezetben is, amelyen a DNS replikációja megy keresztül. Ezek a legfontosabb polimerizáló enzimek, amelyek részt vesznek a replikáció során. A DNS-polimeráz képes nukleotidokat adni a DNS-szál szabad 3'-végéhez, ezáltal új szál meghosszabbítását okozva. Jelenleg a betegségek diagnosztizálásában és az ipari alkalmazásokban a molekuláris biológia fejlődésének következtében fontos különféle előnyös tulajdonságokkal rendelkező polimerázok előállítása. Ez növeli a módszer pontosságát és gyorsabbá teszi azt. A fúzió és a Taq polimeráz két kereskedelemben előállított, stabil stabil polimeráz enzim, amelyeket speciális molekuláris alkalmazásokban használnak. A fúzió egy DNS-polimeráz, amely izolálva van Pyrococcus furiosus és főként klónozási kísérletekben használják a hűség növelése érdekében. A Taq DNS-polimeráz a polimeráz-láncreakcióban (PCR) használt standard DNS-polimeráz, amelyet a hőstabil baktériumból izolálnak; Thermus aquaticus. Az kulcs különbség A két enzim között található a forrás mikroorganizmus. A fúziót izolálják az extremophil-tól, Pyrococcus furiosus míg a Taq-polimerázt izolálják a termofilből, Thermus aquaticus.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi az a fúzió?
3. Mi a Taq polimeráz?
4. A Phusion és a Taq polimeráz hasonlóságai
5. Összehasonlítás - Phusion vs Taq polimeráz táblázatos formában
6. Összegzés

Mi az a Phusion??

Phusion DNS polimeráz egy új polimeráz, amelyet az enzim izolálásával állítanak elő Pyrococcus furiosus, amely extremofil Archaea. Ezek a mikrobák rendkívül magas hőmérsékleten tartózkodnak, ezáltal a polimeráz rendkívül hőstabil polimerázzá válik. A fúziós polimerázt a szokásos hőstabil polimerázzal szembeni rendkívüli hűség elérésére használják; Taq polimeráz. A fúziós polimeráz képes hosszú sablonokat amplifikálni, akár 7,5 kb méretű genomi DNS-ig. A Phusion polimeráz optimális polimerizációs kapacitása 72 ° C⁰ C. A fúziót klónozási termékekben is használják szekvenáláshoz, expressziós elemzéshez és mutációs elemzéshez.

A fúziós DNS polimeráz 3 '- 5' exonukleáz aktivitással rendelkezik. Ez lehetővé teszi az újonnan szintetizált szál ellenőrzését a szintézis után. Ezért a nukleotid eltérések könnyen kijavíthatók. Így alacsonyabb hibaarányú. A Phusion polimeráz általános előnyei a következők:

• Rendkívüli hűség
• Nagy sebesség és csökkentett hosszabbítási idő
• Robusztus reakciók és minimális optimalizálást igényel
• Magas hozam

01. ábra: Fúzió

A Phusion polimeráz fő hátránya, hogy gátolja dezoxiuridin-trifoszfát (dUTP) jelenlétében. Amikor a dUTP-k felhalmozódnak a reakciókeverékben, ez gátolhatja a fúziós polimeráz hatásait. Ezt megakadályozzuk, ha a reakcióelegyet dUTPázzal kezeljük az enzim hozzáadása előtt. Jelenleg a Phusion Polimeráz dUTP-rezisztens változatát, Pfu Turbo néven használják a Phusion polimeráz helyett a probléma megoldására.

Mi a Taq Polymerase?

Taq DNS polimeráz A találmány forradalmasította a molekuláris biológia területét. Megoldotta a DNS amplifikáció egyik fő problémáját. A Taq DNS polimeráz hőstabil polimeráz enzim, amelyet extrahálnak és izolálnak a termofil baktériumból, Thermus aquaticus. Ezen enzimek felfedezése a PCR fejlődéséhez vezet. Ez az enzim lehetővé tette a polimeráz láncreakció alkalmazását a DNS amplifikációban a szokásos fáradságos klónozási technikák helyett. A PCR-t ma már molekuláris diagnosztikában, mezőgazdasági és ipari területeken is alkalmazzák, sok új variációval bővítve a technikát.

02 ábra: Taq polimeráz

A Taq DNS polimeráz a 72 ° C közötti optimális hőmérsékleti tartományban működik⁰C - 80⁰C. A Taq DNS polimerázhoz együtt-tényező szükséges; magnézium a funkciójához. A Taq polimeráznak nincs 3 '- 5' leolvasási képessége, ezért a Taq DNS polimeráz hibaaránya magasabb, mint az újabb típusú DNS polimerázoknál, például a fúziós polimeráznál stb., Azonban a Taq DNS polimeráz népszerűsége továbbra is a ugyanaz az egész tudományban az enzim kényelme és rugalmassága miatt.

Milyen hasonlóságok vannak a Phusion és a Taq polimeráz között??

• Mind a Phusion, mind a Taq polimeráz enzimek olyan polimerizáló enzimek, amelyek képesek nukleotidokat hozzáadni a DNS szál 3 'szabad végéhez.
• A Phusion és a Taq polimerázokhoz egyaránt primer szekvenciára van szükség a polimerizáció megindításához.
• Mind a Phusion, mind a Taq polimerázok hőstabilok.
• A Phusion és a Taq polimerázokat egyaránt használják a PCR mechanizmusokban a DNS amplifikálására.
• Amikor a polimerázt a reakcióelegyhez adják, mind a Phusion, mind a Taq polimerázokat hozzáadják az utolsóhoz, hogy biztosítsák az enzim hatékonyságát..
• Mind a Phusion, mind a Taq polimerázokat kereskedelmi forgalomban szintetizálják molekuláris biológiai kísérleti célokra.
• A Phusion és a Taq polimerázok működéséhez egy kofaktorra van szükség.

Mi a különbség a fúzió és a Taq polimeráz között??

Phusion vs Taq polimeráz
A fúzió egy DNS-polimeráz, amely izolálva van Pyrococcus furiosus és főként klónozási kísérletekben használják a hűség növelése érdekében.	A Taq DNS polimeráz a polimeráz láncreakcióban (PCR) használt standard DNS polimeráz, amelyet a hőstabil baktériumból izolálnak, Thermus aquaticus.
Forrás: Organizmus
A fúziót extremofil archaából nyerik - Pyrococcus furiosus.	Ezek az irodalmi művek a gyarmatosítási periódustól a dekolonizációs periódusig terjednek.
Korrektúrázási képesség
3 és 5 közötti leolvasási képesség van a Phusion-ban.	A Taq-polimerázban a 3 '- 5' -es olvasási képesség hiányzik.
Hűség
Nagy a hűsége a Phusion-nak.	A Taq polimeráz alacsony hűségű.
Erősítés
A fúzió képes hosszú DNS-fragmenseket amplifikálni.	A Taq polimeráz sokkal rövidebb DNS-fragmentumokat képes amplifikálni.
dUTP mérgezés
A fúziós hatást gátolja a felhalmozódási páratlanság.	A Taq-polimerázt nem gátolja a dUPT.

összefoglalás - Phusion vs Taq polimeráz

A fúzió és a Taq DNS polimeráz két hőstabil polimeráz, amelyeket a PCR technikákban használnak. A fúzió egy extremofilból izolált polimeráz, Pyrococcus furiosus mivel a Taq izolálva van a hőstabil baktériumoktól Thermus aquaticus. A Taq DNS polimeráz felfedezése a PCR találmányhoz vezet. A Phusion számos előnye van a Taq-hoz képest, ami a Phusion-t jobb választási lehetőséggé tette a nagy pontosságú DNS előállításához. A Taq polimerázt azonban továbbra is használják szokásos polimeráz enzimként a PCR-ben. Ez a különbség a Phusion és a Taq polimeráz között.

Referencia:

1.Biolabs, Új-Anglia. - Taq DNS polimerázok. New England biolabs: Reagensek az élettudományi ipar számára. Itt érhető el  
2. “Fúziós DNS-polimeráz.” New England biolabs. Itt érhető el 

Kép jóvoltából:

1.'GAM Nivin Nasri'By NivinN szemléltetése - Saját munka, (CC BY-SA 4.0) a Commons Wikimedia segítségével  
2.'Taq'By Adenosine - Saját munka, (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia-on keresztül