Különbség az RP HPLC és a HIC között

Az kulcs különbség az RP HPLC és a HIC között ez Az RP HPLC egy polárosabb mobil fázist és egy kevésbé poláros álló fázist használ. Míg a HIC egy hidrofób, helyhez kötött fázist használ, amely lehetővé teszi a hidrofób molekulák hozzákapcsolódását.

A kromatográfia olyan analitikai módszer, amely segít elkülöníteni a keveréket az alkotóelemek között. Először fel kell oldani a szétválasztandó mintát oldatba. Ezt az oldat-anyag keveréket mozgó fázisnak nevezzük. Ezután a mozgó fázist egy másik anyagon vezetik át, az úgynevezett álló fázist. A helyhez kötött fázis meghatározza az alkatrészek elválasztását. Az elválasztás az anyag megoszlása ​​miatt a mozgófázis és az álló fázis között történik.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi az RP HPLC?
3. Mi a HIC?
4. Side by side összehasonlítás - RP HPLC vs HIC táblázatos formában
5. Összegzés

Mi az RP HPLC??

Az RP HPLC kifejezés jelentése Fordított fázisú nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. Ez magában foglalja az összetevők keverékben történő elválasztását a hidrofób jelleg alapján. A mozgó fázisban lévő hidrofób komponensek kapcsolódnak az immobilizált hidrofób ligandumokhoz az álló fázisban, míg a hidrofil komponensek az álló fázison keresztül eluálódnak anélkül, hogy az álló fázis felületéhez kapcsolódnának..

01. ábra: HPLC készülék

Sőt, ez a módszer több reprodukálhatóságot mutat, összehasonlítva más kromatográfiás technikákkal, és széles körű alkalmazhatóságot mutat. Ezért ezt a módszert laboratóriumokban használjuk az összes HPLC módszer több mint 75% -ára. A mobil fázis nagy részében vizes víz elegyét keverjük el, elegyedő poláris szerves oldószerrel. Így biztosítja a hidrofób komponenseknek az oldatban való rögzítését az álló fázis felületéhez.

Mi a HIC??

A HIC kifejezés jelentése Hidrofób kölcsönhatás-kromatográfia. Ez egy fordított fázisú HPLC, és ezt a módszert főleg nagy biomolekulák, például fehérjék elválasztására használják. Ebben a módszerben vizes közeget kell használni a biomolekula mintájának előállításához. Ennek oka az, hogy a szerves oldószerek a proteinek denaturálását okozhatják. Ezenkívül ez a módszer a nagy molekulák és az álló fázis kissé hidrofób felületének kölcsönhatását használja. Ezenkívül a mintában magas sókoncentrációt kell használni, mert ösztönzi a fehérje megtartását a csomagoláson; ezt a folyamatot sózásnak nevezzük. A sókoncentráció fokozatos csökkentésével a biomolekulákat hidrofób tulajdonságaik alapján külön-külön eluálhatjuk..

Ez a módszer általában az ioncserélő kromatográfiával ellentétes körülményeket alkalmazza. Ebben a technikában először egy pufferoldatot kell átjuttatnunk az oszlopon annak érdekében, hogy csökkentsük az oldott anyag oldódását a mintában. Ez teszi ki a fehérje hidrofób régióit. Ha azonban a molekula hidrofóbabb, kevesebb sóra van szükség a kötés elősegítéséhez. Itt a kevésbé hidrofób oldott anyag eluálódik először, és a sókoncentráció változása szerint több hidrofób oldott anyag eluálódik utoljára.

Mi a különbség az RP HPLC és a HIC között??

A kromatográfia elemzési módszer a keverék komponenseinek szétválasztására. Az RP HPLC és a HIC két speciális kromatográfiás módszer. Az RP HPLC és a HIC közötti fő különbség az, hogy az RP HPLC polárosabb mobil fázist és kevésbé poláros álló fázist használ, míg a HIC hidrofób álló fázist használ, amely lehetővé teszi a hidrofób molekulák hozzákapcsolódását.

Az alábbi infographic összefoglalja az RP HPLC és a HIC közötti különbséget.

Összegzés - RP HPLC vs. HIC

A kromatográfia elemzési módszer a keverék komponenseinek szétválasztására. Az RP HPLC és a HIC két speciális kromatográfiás módszer. Az RP HPLC és a HIC közötti fő különbség az, hogy az RP HPLC polárisabb mozgó fázist és kevésbé poláros álló fázist használ, míg a HIC hidrofób álló fázist használ, amely lehetővé teszi a hidrofób molekulák hozzákapcsolódását.

Referencia:

1. “HPLC elválasztási módok”. Víz, itt elérhető.

Kép jóvoltából:

1. „Preparatív HPLC” - készítette: GYassineMrabetTalk - Saját munka (CC BY 3.0) a Commons Wikimedia segítségével