A rekombináció és a transzformáció két kulcsfontosságú lépés a géntechnikában, ahol a szervezet tulajdonságait szándékosan módosítják a genetikai anyag manipulálásával. A rekombináció egy olyan folyamat, amelynek során idegen DNS-t beépítünk egy vektorgenomba és rekombináns DNS-molekulát képezünk. A transzformáció a következő lépés, amikor a rekombináns molekula bekerül a gazdaszervezetbe. A gazdasejt vagy a szervezet megkönnyíti a rekombináns molekula expresszióját. A transzformánsok és a rekombinánsok közötti fő különbség az, hogy a transzformánsok azok a sejtek vagy szervezetek, amelyek a rekombináns molekulát befogadják és megkönnyítik az expressziót míg A rekombinánsok azok a vektorok, amelyek lehetővé teszik az idegen DNS beépítését a genomjába és transzformációt gazda transzformánsokba expresszió céljából.
TARTALOMJEGYZÉK
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a transzformáns?
3. Mik azok a rekombinánsok?
4. Összehasonlítás egymással - transzformánsok és rekombinánsok
5. Összegzés
A transzformánsok azok a sejtek vagy szervezetek, amelyekben a rekombináns DNS-t felveszik az expresszióhoz. A baktériumokat általában gazdaorganizmusként használják a géntechnikában, mivel laboratóriumi körülmények között könnyen szaporodnak, szaporodnak és kezelhetők, és a transzformációs folyamat más szervezetekkel összehasonlítva egyszerű. A géntechnikában alkalmazott legnépszerűbb gazda baktérium a baktérium E coli.
A transzformációs folyamat során a gazdasejteket indukálják a rekombinánsok felvételére. Néhány gazdasejt azonban nem veszi fel a rekombináns molekulákat. Ezek nem transzformánsok, és a sejtek, amelyek rekombináns DNS-molekulákat tartalmaznak, transzformánsokként is ismertek. A nem transzformánsok közül a transzformánsok kiválasztását szelektálható markerek segítségével végezzük a molekuláris biológiában. A szelektálható markereket a DNS-inszerttel együtt beiktatjuk a vektor genomba. Az általánosan használt választható markerek antibiotikum-rezisztens gének. A markergének megkönnyítik a transzformánsok differenciálódását és folytatják a folyamatot. A transzformációs folyamat után a baktériumot antibiotikumokat tartalmazó közegben tenyésztjük. Csak a transzformánsok képesek növekedni ezen a táptalajon, mivel a rekombinánsok belül vannak.
Amint a rekombináns DNS-molekula transzformálódik a gazdaszervezetben, az idegen DNS integrálható a gazdasejt genomjába, vagy nem integrálódhat a citoplazmában. Az idegen DNS expressziója és replikációja azonban a gazdaszervezetben történik, és a kívánt eredményt hozza a folyamatból.
A rekombináns olyan organizmus vagy sejt, amely rekombinált genomot tartalmaz idegen DNS-t tartalmaz. A rekombinánsok a géntechnikai folyamat eredménye. Mesterségesen vannak megépítve in vitro az érdeklődő gének beillesztésével és a genom módosításával. Gyakran a baktérium plazmidok és bakteriofágok rekombinánsként hatnak a géntechnikában. Különböző DNS-ek kimérával rendelkezik. A rekombináns DNS-molekula idegen DNS-t hordoz a gazdaszervezetbe, és expresszáltatja és formálja a kívánt terméket.
A rekombináns molekulákat restrikciós endonukleázok és DNS-ligázok felhasználásával állíthatjuk elő. A kívánt DNS-fragmenst elválasztjuk az eredeti organizmustól és beillesztjük a vektorba, hogy a rekombinánsot átalakítsuk. A szóban forgó gén kivágását és a vektor organizmus megnyitását ugyanazon restrikciós enzim alkalmazásával kell elvégezni, hogy összeférhető ragacsos végeket hozzanak létre, hogy összekapcsolódjanak. Miután az idegen DNS-t beépítették a vektor genomba, rekombináns vagy rekombináns DNS-molekulának nevezik.
02 ábra: Rekombináns DNS
Transzformánsok és rekombinánsok | |
A transzformánsok azok a sejtek, amelyekben rekombináns DNS-molekula van. | A rekombinánsok a vivőmolekulák, amelyek idegen DNS-t helyeznek be a saját genomba. |
Idegen DNS expressziója | |
Ezek a gazdasejtek képesek expresszálni a rekombináns DNS-t. | Képeseknek kell lenniük arra, hogy önmagukban replikálódjanak a gazdaszervezetben. |
Kiválasztás | |
Gazdasejtekként kiválasztjuk azokat a sejteket, amelyek könnyen termeszthetők és szaporodhatnak. | Könnyen kivonhatónak és választható markereket kell tartalmazniuk. |
A transzformánsok azok a sejtek vagy szervezetek, amelyekben rekombináns DNS-molekulák vannak. A rekombinánsok azok a szervezetek vagy sejtek, amelyek genetikai rekombináción mentek keresztül, és idegen DNS-vel rendelkeznek a genomjukban. A baktériumsejteket gyakran használják gazdasejtekként a transzformációhoz, a plazmidokat és bakteriofágokat gyakran vektorokként a rekombináns DNS technológiában. Ez a különbség a transzformánsok és a rekombinánsok között.
Irodalom:
1. Griffiths, Anthony JF. - Rekombináns DNS előállítása. Bevezetés a genetikai elemzésbe. 7. kiadás. Amerikai Egyesült Államok Nemzeti Orvostudományi Könyvtára, 1970. január 1., web. 2017. április 8
2. Cooper, Geoffrey M. „Rekombináns DNS”. A cella: molekuláris megközelítés. 2. kiadás. Amerikai Egyesült Államok Nemzeti Orvostudományi Könyvtára, 1970. január 1., web. 2017. április 8
Kép jóvoltából:
1. A „plazmidok rekombináns képződése”: Minestrone Soup az angol Wikipedia-ban (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével