Különbség a YAC és az M13 fágvektor között

Legfontosabb különbség - YAC vs M13 Phage Vector
 

A DNS-klónozás fontos folyamat, amely lehetővé teszi az organizmusok fontos DNS-fragmentumainak szaporítását. Szükség van egy specifikus DNS és a vektor DNS összekapcsolására rekombináns DNS létrehozása céljából, amely transzformálódik a gazdaszervezetbe. A vektor olyan DNS-molekula, amely hordozóként viselkedik, hogy idegen genetikai anyagot szállítson egy másik sejtbe vagy szervezetbe. Képesnek lennie arra, hogy replikálódjon a gazdaszervezet belsejében, és több példányban előállítsa a rekombináns DNS-t. Különböző típusú vektorok vannak a DNS-klónozásban. Az élesztő mesterséges kromoszóma (YAC) és az M13 fágvektor két típusa. A fő különbség az YAC és az M13 fágvektor között az A YAC egy mesterséges kromoszóma, amely replikálódik az élesztősejtekben míg Az M13 fágvektor az M13 bakteriofág egyszálú, kör alakú DNS-je, amely a benne replikálódik E Coli sejteket.

TARTALOMJEGYZÉK
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi az a YAC?
3. Mi az M13 Phage Vector?
4. Összehasonlítás egymással - YAC vs M13 Phage Vector
5. Összegzés

Mi az a YAC vektor??

Az YAC egy mesterségesen felépített kromoszóma, amely képes idegen DNS nagy részét hordozni és replikálódni az élesztősejtekben. Centromer, telomer és autonóm módon replikáló szekvenciákkal rendelkezik, amelyek nélkülözhetetlenek a replikációhoz és a stabilitáshoz. Az YAC-nak szelektív markert vagy markereket és restrikciós helyeket is tartalmaznia kell, hogy ez hatékony klónozási vektor legyen. Az 1000 és 2000 kb közötti nagy szekvenciákat be lehet illeszteni az YAC-ba és átvinni az élesztőbe.

01. ábra: YAC vektor

Mi az M13 Phage Vector??

Az M13 bakteriofág egy vírus, amely megfertőzi és szaporodik benne E Coli. Az M13 bakteriofág genomja kicsi, körülbelül 6,7 kb. Ez egyszálú, kör alakú és pozitív érzékű DNS. Ez a vírus kifejezetten megfertőzi E Coli baktériumok az F pálcán keresztül. Miután belépett az ssDNS-be a baktériumba, szintetizálja a komplementer szálat és dsDNS-nek vagy az M13 replikációs formájává (RF) válik. Az RF úgy viselkedik, mint egy plazmid a gazdaszervezetben. A dsDNA replikálódik belül E Coli és új fágokat hordozó ssDNS-t állít elő. Ezek az új fágok folyamatosan felszabadulnak a E Coli anélkül, hogy megölnénk a gazdasejtet. A fertőzés azonban lelassítja az E Coli növekedését. A dsDNS kivonható baktériumsejtekből és felhasználható vektorként a DNS klónozásában. M13 fágvektorokként ismertek. Könnyen manipulálhatók és felhasználhatók a plazmidvektorokhoz hasonlóan.

Ezeknek az M13-fágoknak a bennük rejlő fertőzőképessége jó tulajdonságot jelent arra, hogy vektorként használják a génklónozást. Amikor az M13-at vektorré alakítja, több elemet be kell építeni a genomba. Ezek a lac represszor (lac I) fehérje génjei, az operátor proximális régiója lac Z gén, lac promoter és többszörös klónozási hely (polilinker). Ha vektorként használják az M13 dsDNS-ét, plazmidvektorként kezelhető. Az ssDNA M13 alkalmazásának azonban előnyei vannak a DNS-szekvenálásban és a helyspecifikus mutagenezisben.

Mivel az M13 fágvektor több klónozási helyet hordoz lacZ régióban a rekombinált vektorok könnyen azonosíthatók az IPTG-t és X-Gal-t tartalmazó agarlemezeken végzett kék / fehér kolónia szkrínelésével. A lemezeken előállított kék plakkok nem tartalmazzák a rekombinált fágokat. Ezért a beszúrásos fágok kiválaszthatók a klónozás céljából.

02 ábra: M13 bakteriofág

Mi a különbség az YAC és az M13 Phage Vector között?

YAC vs M13 fág vektor
A YAC egy genetikailag módosított kromoszóma, amely képes idegen DNS nagy részét hordozni és replikálódni az élesztősejtekben.	Az M13 fágvektor az M13 bakteriofág által kifejlesztett vírusvektor, amelyet idegen DNS beillesztésére használnak E Coli.
Célja
Az YAC-kat úgy tervezték, hogy a genomi DNS nagy fragmentumait élesztőbe klónozzák.	Az M13 fágvektorokat idegen DNS beillesztésére használják E Coli.
Beszúrás hossza
Az YAC-k tartalmazhatnak megabázis méretű genomi betéteket (1000 kb - 2000 kb).	A betétek mérete körülbelül 1500 bps.
Építkezés
A YAC-DNS-t intakt tisztítani nehéz, ezért magas koncentrációra van szükség az YAC-vektorrendszer előállításához.	Ez ciklikus fotoszintetikus elektronláncon keresztül történik.
Stabilitás
A YAC instabil.	Az M13 fágok könnyen kivonhatók.
Méret
Az enzimek nagyobb molekulák.	Az M13 fágok stabilak, mint a YAC.

Összegzés - YAC vs M13 Phage Vector

Az YAC egy mesterségesen előállított vektorrendszer, amely az élesztő kromoszóma egy meghatározott régióját használja a genetikai anyag nagy szegmenseinek az élesztősejtekbe történő beillesztésére. Az M13 fágvektor az M 13 bakteriofágból származó vektorrendszer, amely felhasználja E coli mint gazdaszervezet. Ez a fő különbség a YAC és az M13 Phage Vector között. Mindkettő egyaránt hasznos a rekombináns DNS technológiában és a génklónozásban.

Referencia:
1.”Vector„. Genetikai jegyzetek - vektor. N.p., n.d. Web. 2017. május 16. https://genetics-notes.wikispaces.com/Vector
2. "Élesztő mesterséges kromoszóma." Wikipedia. Wikimedia Alapítvány, 2017. április 21. Web. 2017. május 16. .

Kép jóvoltából:
1. „M13B” J3D3-val - Saját munka (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével