Az kulcs különbség a versenyképes és a nem versenyképes ELISA között az A kompetitív ELISA egy gátló antigént használ, míg a nem kompetitív ELISA nem használ gátló antigént a vizsgálathoz.
Az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat (ELISA) egy immunológiai vizsgálat, amely különféle célpontokat, például antitesteket, antigéneket, fehérjéket és glikoproteineket detektál. Ez egy gyors és egyszerű módszer a végrehajtásra. Ezért gyakrabban használják kutatási és diagnosztikai célokra. Az ELISA magában foglalja az enzimek alkalmazását, valamint az ellenanyag és antigén specifikus kötődését. A reakciók alakulásának alapján az ELISA négy típusa van: közvetlen ELISA, közvetett ELISA, szendvics ELISA és gátló ELISA. A direkt, közvetett és szendvics ELISA a nem versenyképes ELISA típusai, míg a gátló ELISA a komplementer ELISA típusa. A cikk célja a versenyképes és a nem versenyképes ELISA közötti különbség megvitatása.
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a versenyképes ELISA?
3. Mi a nem versenyképes ELISA?
4. A versenyképes és a nem versenyképes ELISA hasonlóságai
5. Összehasonlítás - Versenyképes és nem versenyképes ELISA táblázat formájában
6. Összegzés
A kompetitív ELISA a jel interferencia felismerésével méri a mintában az antigénkoncentrációt. Itt a teszt inhibitor antigént használ. Ezért ez egy gátlási ELISA. Ezen eljárás során a mintában lévő antigének versenyeznek a kiválasztott referencia-antigénnel a jelölt antitest meghatározott mennyiségéhez való kötődésért. Ezenkívül ez az eljárás a minta inkubálásával kezdődik, a jelölt antitest felesleges mennyiségével. Ezenkívül a referencia antigént előzetesen be kell fedni egy több üreges vizsgálati lemezen. Ezután a mintakeveréket hozzá kell adni a referenciaantigént tartalmazó vizsgálati lemezhez. A szabad antitestek a mintában lévő antigén mennyiségétől függően kötődnek a referencia antigénhez. Ennélfogva, ha több minta antigén van jelen, kevesebb referencia antigént fog kimutatni. Így gyengébb jelet hoz létre.
01. ábra: ELISA
Ezzel szemben, ha a minta kevesebb antigént tartalmaz, egyre több referenciaantigén fogja elfoglalni az ellenanyagokat, és erős jelet ad. Mivel a kompetitív ELISA erősebb jelet ad, ha a minta alacsony mennyiségű antigént tartalmaz, a kompetitív ELISA nagyon érzékeny vizsgálat, még kisszámú antigén minták esetén is.
Néhány kompetitív ELISA készletben jelölt antigént használnak jelölt ellenanyag helyett. Itt a jelölt antigén és a mintaantigén verseng az elsődleges antitesthez való kötődésért. Hasonlóképpen, ha a mintában az antigén mennyisége alacsony, akkor az antitestekhez kötődő jelölt antigén mennyisége nagyobb lesz, és erősebb jelet hoz létre.
A négy ELISA típus közül három nem versenyképes ELISA. Ezek közvetlen ELISA, közvetett ELISA és szendvics ELISA. Mindhárom formátum az ELISA közös elve alapján működik, metodikáikban kissé eltérve.
A közvetlen ELISA enzimmel jelölt primer ellenanyagot használ. Ezért nincs szükség másodlagos antitestre. Ezért a közvetlen ELISA gyorsabb, mint más típusú ELISA. Az elsődleges antitest közvetlenül kötődik az immobilizált cél antigénhez, amely a lemezen található. Ennélfogva az enzim-szubsztrát reakció zajlik, látható jelet produkálva.
02 ábra: Szendvics ELISA
A közvetlen ELISA-val ellentétben az indirekt ELISA nem jelölt primer ellenanyagot és enzimmel jelölt másodlagos ellenanyagot használ. Miután az elsődleges antitest kötődik az immobilizált antigénhez, a másodlagos antitest az elsődleges ellenanyaghoz kötődik. A szekunder antitestben lévő enzim reagál az antigénnel, és látható jelet generál. A szendvics-ELISA eltér mind a közvetlen, mind a közvetett ELISA-tól. Itt az ellenanyagot rögzítjük a vizsgálati lemez falához.
A kompetitív ELISA olyan típusú ELISA, amely korlátozott mennyiségű specifikus antitest esetén az analit antigén és a jelölt antigén közötti teljesítésre támaszkodik. Másrészt nem létezik ilyen verseny a kérdéses antigén és a referenciaantigén között a nem versenyképes ELISA-ban. Tehát ez a legfontosabb különbség a versenyképes és a nem versenyképes ELISA között. Hasonlóképpen, a kompetitív ELISA egy gátló ELISA, míg a nem versenyképes ELISA nem gátló ELISA. Tehát ez is különbség van a versenyképes és a nem versenyképes ELISA között.
Ezenkívül a kompetitív ELISA alkalmasabb az érdeklődésre számot tartó antigén alacsony mennyiségének mérésére. Ez egy érzékeny módszer. Másrészt a nem versenyképes ELISA nem függ a mintában lévő antigének számától. Ezért ez is különbség van a versenyképes és a nem versenyképes ELISA között.
Az infographic alatt elmagyarázza a versenyképes és a nem versenyképes ELISA közötti különbséget összehasonlítva.
A kompetitív és nem versenyképes ELISA az ELISA vagy az enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálatok két fő típusa. A versenyképes és a nem versenyképes ELISA közötti különbség összegzésében a kompetitív ELISA az érdeklődésre számot tartó antigén és a referencia-antigén közötti versenyre támaszkodik az ellenanyagok korlátozott mennyisége felé. Ezért a kompetitív ELISA-t gátló ELISA-nak is nevezik. Másrészt a nem versenyképes ELISA nem támaszkodik a cél antigének és a referencia antigének közötti versenyre. A jelölt specifikus antitest feleslegét használja fel a kérdéses elemzéshez. Tehát ez a legfontosabb különbség a versenyképes és a nem versenyképes ELISA között. A direkt ELISA, az indirekt ELISA és a szendvics ELISA a nem versenyképes ELISA három fő típusa.
1. Bio-Rad. „Az ELISA típusai | Bio-Rad „. Bio, itt elérhető.
2. „Az ELISA négy típusa.” Cusabio Life Science - Az Ön biológiai tudományos partnere, elérhető itt.
“Elisa tipus” készítette: Carolfv333 - Saját munka (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
Nickwich által készített „szendvicsimmunológiai vizsgálat, ELISA” - Saját munka (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével