Elektroforézis vs elektrooszmozis
A fizikai elválasztási módszerek, például a szűrés, a desztilláció és az oszlopkromatográfia nem egyszerű módszerek egyes molekulák elválasztására. Az elektroforézis és az elektro-ozmózis két másik elválasztási módszer, amelyek felhasználhatók a töltött részecskék elválasztására.
Mi az elektroforézis??
Az elektroforézis a molekulák méretük alapján történő elválasztásának technikája. Ennek az elválasztásnak alapvető eleme a molekula töltése és képessége az elektromos térben történő mozgatásra. Ez a molekuláris biológia leggyakoribb és legfontosabb módszere a molekulák, különösen a DNS és a fehérjék szétválasztására. Ez elsősorban azért van használatban, mert viszonylag egyszerű és olcsó. Az elektroforézis készüléke kissé bonyolult lehet, és előkészítése időbe telik. De a laboratóriumban található dolgokból könnyen elkészíthetünk elektroforézis készüléket. Az elektroforézis technikái céloktól függően változhatnak. Használhatunk egydimenziós elektroforézist a DNS vagy fehérje elválasztására. Kétdimenziós elektroforézist alkalmaznak, ha több felbontású mintára van szükség (mint az ujjlenyomat esetében). Hordozóközegként gélt alkalmazunk a molekulák elválasztására. Ezt a gélt lapos lemezekként vagy csövekben is el lehet készíteni. Ennek az eljárásnak a alapja a molekulák elválasztása a gélen keresztüli mozgásuk sebességétől függően, amikor elektromos mezőt szolgáltatnak. A negatív töltésű molekulák, mint például a DNS, általában a pozitív pólus felé haladnak ebben az elektromos mezőben, míg a pozitív töltésű molekulák általában a negatív pólus felé haladnak. Az elektroforézisben kétféle gélt használnak agaróz és poliakrilamid formájában. Ezeknek a kettőnek a megkülönböztető képessége eltér. A gél szitaként működik a különböző méretű molekulák kiszűrésére. A gélben beállított elektrosztatikus töltések erőként hatnak.
Az elválasztás az ionok mobilitásától függ.
F = fv = Zee
V = ZeE / f
F = a részecskére ható erő
f = súrlódási együttható
V = átlagos migrációs sebesség
Z = a migráló részecske töltése
e = alapvető töltés
E = az elektromos mező erőssége
Az elektroforézishez szükséges feltételek viszonylag egyszerűek. A gél előállításához és a minta futtatásához puffert használunk. A jelölőket és színezékeket használják a megjelenítéshez.
Mi az elektro-ozmózis??
Ez egy folyadék mozgatása egy anyagon keresztül egy alkalmazott elektromos mező alkalmazásával. A mozgás porózus anyagon, kapillárison, membránon stb. Keresztül haladhat. Ezt elválasztási technikaként lehet alkalmazni (különösen a kapilláris elektro-ozmózis). A folyadék sebessége lineárisan arányos az alkalmazott elektromos mezővel. Az is függ a csatorna felépítéséhez használt anyagtól és az alkalmazott megoldástól. Az interfészen az oldat és az anyag ellentétes töltésekkel rendelkezik, és ezt elektromos kettős rétegnek nevezik. Amikor elektromos mezőt alkalmaznak az oldatra, az elektromos kettős réteg a kapott Coulomb-erő által mozog. Ezt elektro-ozmotikus áramlásnak nevezik.
Mi a különbség az elektroforézis és az elektro-ozmózis között?? • Elektroforézis során a szilárd részecskéket (makromolekulákat, például nukleinsavakat vagy fehérjéket) elektromos mező segítségével mozgatják. De elektro-ozmózisban folyadék mozog. • Elektroforézis során a szilárd hordozóanyag egy gél. De elektro-ozmózissal lehet gél, membrán, kapilláris stb. |