Különbség a vízszintes és a függőleges gél elektroforézis között

Fő különbség - vízszintes és függőleges gél elektroforézis
 

A gélelektroforézis a genetikában alkalmazott laboratóriumi technika, amely a DNS-t, RNS-t és más fehérjéket tartalmazó keverékeket szétválasztja a töltésük és molekuláris méretük szerint. A DNS-t, RNS-t vagy fehérjéket, amelyeket ebben az eljárásban el kell választani, egy olyan gélen vezetjük át, amely kis pórusokat tartalmaz. A molekulákat elektromos mező hajtja át a gélen. A molekulák áthaladnak a gél pórusaiin, és a mozgás sebessége fordítottan arányos a hosszukkal. Ezért az alacsonyabb molekulájú molekulák gyorsabban mozognak, mint a nagyobb molekulatömegű molekulák. Az elektromos mezőt a gél két végének töltési különbsége generálja. Az egyik vége pozitív töltést tartalmaz, a másik vége negatív töltést tartalmaz. Mivel a DNS és az RNS molekulák negatív töltésűek, akkor vonzódnak a gél pozitív töltésű vége felé. A gél elektroforézise kétféle módszer lehet: vízszintes gél elektroforézis és vertikális gél elektroforézis. Vízszintes gélelektroforézis során a gél vízszintes helyzetben van, és folyamatos futópufferbe merítik, amely maga a géldobozban van. Függőleges gélelektroforézis során a pufferrendszer függőlegesen van orientálva, és nem szakad meg két tetejével és alján lévő katóddal, katóddal és anóddal.. Ez a legfontosabb különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a vízszintes gél elektroforézis?
3. Mi a függőleges gél elektroforézis?
4. A vízszintes és a függőleges gél elektroforézis hasonlóságai
5. Összehasonlítás egymással - vízszintes és függőleges gél elektroforézis táblázatos formában
6. Összegzés

Mi a vízszintes gél elektroforézis??

A vízszintes gél-elektroforézis az alapelvet használja a DNS, RNS vagy fehérje molekulák molekuláris méretük és töltésük szerinti elválasztására. Ebben a technikában a gél vízszintes helyzetben van, és folyamatos pufferbe merül. Az agarózgél segítségével a géldobozt két rekeszre oszthatják. A géldoboz egyik vége anódot tartalmaz, míg a másik vége katódot tartalmaz. Ha áramot alkalmaznak, az ebben a technikában használt puffer lehetővé teszi egy töltési gradiens létrehozását. A töltés alkalmazásakor a gél hajlamos felmelegedni. A puffer hűtőfolyadékként is működik, amely fenntartja a hőmérsékletet az optimális szinten. A futó puffer visszakeringetése megakadályozza a pH-gradiens kialakulását. A nem-folytonos pufferrendszert nem lehet használni a vízszintes gél-elektroforézis során, mivel a gél-rendszer két rekesze kapcsolódik a futópufferhez. Az akrilamidot gélelektroforézis során használják a fehérjekeverékek elválasztására.

01. ábra: Vízszintes gél elektroforézis

A vízszintes gélelektroforézis során az akrilamid nem használható fel, mivel a géldoboz oxigén hatásának van kitéve. Az oxigén jelenléte miatt az akrilamid polimerizációja gátolt, és ez gátolja a gél képződését. A vízszintes gél-elektroforézis erőfeszítés nélküli módszer, amelyet a DNS és az RNS elválasztására használnak.

Mi a függőleges gél elektroforézis??

A vertikális gélelektroforézis technika a gélelektroforézis elsődleges elmélete szerint működik, ám ez bonyolultabbnak tekinthető, mint a vízszintes gélelektroforézis módszer. Ez a technika nem-folytonos puffert használ. A katód a felső kamrában, az anód az alsó kamrában található. Az egyes rekeszekben lévő elektródák biztosítják a szükséges elektromos mezőt. A két szerelt üveglap között vékony gélréteget öntsünk. Ezért a gél felső részét a felső kamrába merítjük, a gél alsó részét pedig az alsó kamrába merítjük. Az áram bevezetése után a puffer kis része az alsó kamrába mozog a felső kamrából a gélen keresztül. Az ebben a technikában alkalmazott áram perc egységek.

02 ábra: Függőleges gél elektroforézis

Függőleges gél-elektroforézis során a puffer csak a gélen áramlik át. Ez lehetővé teszi a feszültséggradiens pontos ellenőrzését az elválasztási szakaszban. Az akrilamid-gél használható, mivel a rekeszek nem vannak kitéve atmoszférikus oxigén hatásának. Az akril-amid gél kisebb pórusméretének köszönhetően a pontos elválasztás nagyobb felbontással érhető el.

Milyen hasonlóságok vannak a vízszintes és a függőleges gél-elektroforézis között??

• Mindkét rendszer a gélelektroforézis alapelve szerint működik.
• Az anódot és a katódot biztosítják a szükséges elektromos mező biztosításához mindkét rendszerben.

Mi a különbség a vízszintes és a függőleges gél elektroforézis között??

Vízszintes és függőleges gél elektroforézis
A vízszintes gél elektroforézis egy gélelektroforézis technika, amelyben a gél vízszintes helyzetben van jelen.	A függőleges gél-elektroforézis egy gél-elektroforézis technika, amelyben a gél függőlegesen van orientálva.
ütköző
A vízszintes gél elektroforézis folyamatos puffert tartalmaz.	A futópuffer függőleges gél-elektroforézis során nem szakaszos.
Az akrilamid felhasználása
Az akrilamid nem használható vízszintes gélelektroforézishez, mivel a géldobozt atmoszférikus oxigénnek teszik ki.	Mivel a gél két külön kamra miatt nincs kitéve a légköri oxigénnek, az akrilamid felhasználható lenne a függőleges gél elektroforézishez.
Funkció
A vízszintes gél elektroforézist gyakran használják a DNS és az RNS keverékek elválasztására, a fehérjék azonban nem.	A fehérjekeverékek elválasztására vertikális gél-elektroforézist alkalmaznak.

Összegzés - vízszintes és függőleges gél elektroforézis

A gélelektroforézis laboratóriumi technika, amelyet széles körben használnak a DNS, RNS és fehérjék molekuláit tartalmazó keverékek elválasztására. A gélelektroforézisnek két módja van: vízszintes és függőleges gélelektroforézis. Vízszintes gél-elektroforézisnél a futópuffer folyamatos, míg a függőleges gél-elektroforézisnél nem szakaszos. Ez a különbség a vízszintes és a függőleges gélelektroforézis között. Mindkét rendszer a gélelektroforézis általános elve szerint működik.

Töltse le a vízszintes és függőleges gél elektroforézis PDF változatát

Letöltheti e cikk PDF verzióját, és offline célokra felhasználhatja, az idézet megjegyzésének megfelelően. Töltse le itt a PDF verziót. A vízszintes és a függőleges gél elektroforézise közötti különbség.

Irodalom:

1.Warren, Chad M., et al. "Függőleges agaróz gél elektroforézis és nagy molekulatömegű fehérjék elektroblotálása." Elektroforézis, vol. 24., nem 2003, 11, 1695-1702. Oldal, doi: 10.1002 / elps.200305392.
2. „Vízszintes és függőleges gélrendszerek - A vízszintes gélrendszer.” Nemzeti diagnosztika, elérhető itt. Belépés 2017. augusztus 28.

Kép jóvoltából:

1. Jeffrey M. Vinocur „Gél elektroforézis készüléke” - Saját munka (CC BY 2.5) a Commons Wikimedia segítségével
2. A proteinek poliakrilamid gél elektroforézise. Jean-Etienne Minh-Duy Poirrier, Bruxelles, Belgium - Proteinek egydimenziós gél elektroforézisben (CC BY-SA 2.0) a Commons Wikimedia segítségével