A legfontosabb különbség a HPLC és a HPTLC között az A HPLC lehetővé teszi az összetevők kvantitatív elválasztását a mintában, míg a HPTLC nem teszi lehetővé az összetevők mennyiségi elválasztását a mintában.
A kromatográfia egy fizikai elválasztási módszer, amelyet a keverék komponenseinek elválasztására és azonosítására használnak. Mind a HPLC, mind a HPTLC kromatográfiás módszer. A HPLC nagyteljesítményű folyadékkromatográfia. A HPTLC nagy teljesítményű vékonyréteg-kromatográfia.
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a HPLC?
3. Mi a HPTLC?
4. Side by side összehasonlítás - HPLC vs. HPTLC táblázatos formában
5. Összegzés
A HPLC nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. Ez egy elemzési módszer a keverék komponenseinek elválasztására, azonosítására és mennyiségi meghatározására. Ebben a módszerben a mintát megfelelő oldószerben oldjuk. Ezután az oldószert és a mintát egy adott nyomással egy szivattyún vezetjük át. A szivattyú szilárd adszorbens anyaggal van feltöltve. Ezután egyes alkatrészek erősen kötődnek az abszorbens anyaghoz, míg más alkatrészek lazán kötődnek. Ennek következtében az alkatrészek eltérő áramlási sebességgel rendelkeznek a szivattyún. Ezért az alkatrészek könnyen elválaszthatók.
01. ábra: HPLC rendszer
Az adszorbens anyag, amely kitölti a szivattyút, a álló fázis. Az oldott mintát tartalmazó oldószert mobil fázisnak nevezzük. Az ebben a technikában alkalmazott szivattyút oszlopnak nevezzük. Az oszlopot adszorbens anyaggal, leggyakrabban szilícium-dioxid-részecskékkel töltötték meg. Ezeknek a részecskéknek a mérete 2-50 μm lehet. Az elválasztási folyamatot befolyásolja a mozgófázis összetétele és a rendszer hőmérséklete. Az álló fázis és a mintában levő komponens közötti kölcsönhatások lehetnek hidrofób kölcsönhatások, dipól-dipól kölcsönhatások, ionos kötés stb..
A HPLC üzemi nyomása jóval magasabb, mint a hagyományos folyadékkromatográfiaé. 50-350 bar körül helyezkedik el. A folyadékkromatográfia és a HPLC közötti különbség abban áll, hogy folyadékkromatográfiában a minta gravitáció alatt esik az oszlopon, míg a HPLC során a mintát az oszlopon nyomás alá helyezzük. Az oszlop mérete és az abszorbens részecskék szintén nagyon kicsik a hagyományos folyadékkromatográfiához képest. A HPLC módszerrel megadott felbontás azonban jobb.
A HPTLC nagy teljesítményű vékonyréteg-kromatográfia. Ez a hagyományos TLC fejlett és automatizált formája. Ez a technika rövid idő alatt hatékony felbontást biztosít. Ebben az elemzési módszerben a mintát és a referenciát egyszerre lehet elemezni, amely lehetővé teszi a minta összehasonlítását a referenciával. Javított analitikai pontosságot nyújt, mint a többi kromatográfiás módszer. Az elemzéshez kevesebb idő szükséges. A technika olcsó technika.
02 ábra: Élelmiszer-színezékek elemzése HPTLC alkalmazásával
A HPTLC módszer egyszerű eljárás, és a minta előkészítését szintén kiküszöböljük (A hagyományos TLC módszer szerint a minta előkészítését beiktatjuk az elválasztás előtt. Ez a lépés magában foglalja a tisztítást és a dúsítást). Az oldószer közvetlenül felhasználható bármilyen előkezelés nélkül, bár más kromatográfiás technikák előkezelést igényelnek, például gáztalanítást, szűrést stb..
A HPTLC-ben alkalmazott adszorbens anyag nagyon kicsi szemcseméretű szilikagél. A hagyományos TLC-ben a szilícium-dioxid részecskemérete 5-20 μm, míg a HPTLC-ben 4-8 μm. A mintát felhordó készülék segítségével a HPTLC lemezre visszük fel. Egységes és biztonságos alkalmazást biztosít. Ezután a lemezeket egy mozgatható fázissal rendelkező kamrába helyezzük. A kamrát telíteni kell a mozgófázis gőzével. A HPTLC folyamat után a mozgó foltok kimutathatók. A lemez foltok észlelésekor a HPTLC technika megfelelő UV-régiót vagy jódkamrát használ.
HPLC vs. HPTLC | |
A HPLC nagyteljesítményű folyadékkromatográfia. | A HPTLC nagy teljesítményű vékonyréteg-kromatográfia. |
Technika | |
HPLC-ben az oldószerrel ellátott mozgófázist az álló fázissal töltött oszlopon vezetjük. | HPTLC-ben a mintát egy TLC-lemezen foltolják, és a mozgófázist tartalmazó kamrába helyezik; akkor a mintát hagyjuk felfelé vándorolni a lemez mellett a mozgófázissal együtt. |
Mérés | |
A HPLC-ben az összetevők áramlási sebessége közötti különbségeket az oszlopon keresztül kell felhasználni a mintában lévő összetevők elválasztására. | A HPTLC-ben a mintában szereplő egyes alkotóelemek által megtett távolságok közötti különbségeket kell felhasználni a mintában szereplő összetevők elválasztására. |
Mennyiségi szétválasztás | |
A HPLC lehetővé teszi a komponensek kvantitatív elválasztását a mintában. | A HPTLC nem teszi lehetővé a komponensek mennyiségi elválasztását a mintában. |
A HPLC és a HPTLC két kromatográfiás módszer. A legfontosabb különbség a HPLC és a HPTLC között az, hogy a HPLC lehetővé teszi a komponensek kvantitatív elválasztását a mintában, míg a HPTLC nem teszi lehetővé a komponensek kvantitatív elválasztását a mintában.
1. „Nagyteljesítményű folyadékkromatográfia.” Wikipedia, Wikimedia Alapítvány, 2018. április 10., elérhető itt.
2. „HPTLC.” LinkedIn SlideShare, 2011. május 30., elérhető itt.
1. „HPTLCplatetoMS” Kjaergaard által az angol Wikipedia-ban - Az en.wikipedia-ból a Commons-ba (Public Domain) átvitel a Commons Wikimedia-on keresztül
2. „Hplc” PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockTársult professzor (Privatdozentin) Hohenheimi EgyetemÉlelmiszerkémiai Intézet - Morlock G., Oellig C., CAMAG 103 (2009) bibliográfiai szolgálat (2009) a Commons Wikimedia segítségével