Vizsgáljuk meg először a HPLC és az LCMS jelentését, mielőtt elemezzük a HPLC és az LCMS közötti különbséget. A kromatográfia elválasztási módszer a kémiai elemzésben, ahol a minta összetevőit szétválasztják a kromatográfiás közegen történő áthaladás során. Ez magában foglalja a minta, az állófázis és a mozgófázis közötti interakciót is. A HPLC jelentése Nagyteljesítményű folyadékkromatográfia, és folyadékkromatográfiás módszerként alkalmazzák az analitikai kémiában. A kombináció Folyadékkromatográfia és tömegspektroszkópia (LCMS) kifejlesztették a kiválasztott biomolekulák kvantitatív elemzésére, és így van egy nagyon érzékeny, pontos és specifikus vizsgálati eljárás a HPLC-hez viszonyítva. Ez a kulcskülönbség a HPLC és az LCMC között. Ez a cikk bemutatja a HPLC-vel és az LCMC-vel, amelyek a kémiai elemzéssel foglalkoznak, és megvitatják a HPLC és az LCMS közötti különbségeket.
A nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) népszerű elválasztási technika az analitikai kémiában. Főleg az összetevők elválasztására, a keverékben lévő egyes összetevők azonosítására és mennyiségi meghatározására használják. Korábban ezt a módszert ismerték nagynyomású folyadékkromatográfia mert az a szivattyúktól függ, hogy egy mintát tartalmazó keveréket tartalmazó, nyomás alatt álló folyékony oldószert áramoltasson egy szilárd adszorbens anyaggal töltött oszlopon. A mintakeverék minden egyes alkotóeleme eltérően kölcsönhatásba lép a szilárd adszorbens anyaggal, ami a különböző összetevők eltérő áramlási sebességét eredményezi. Ez az összetevők elválasztásához vezethet, amikor a HPLC oszlopból kifolynak.
A HPLC-t különféle célra használják alkalmazások úgymint a vér D-vitamin szintjének elemzése, illegális kábítószer-használat a sportolók körében a vizeletben levő gyógyszermaradékok kimutatásával, összetett biológiai minta alkotóelemeinek szétválasztása kutatási célokra és elemzésre, és gyógyszergyártás.
A folyadékkromatográfia-tömegspektrometria (LCMS) egy olyan analitikai technika, amely a folyadékkromatográfia fizikai elválasztási képességeit és a tömegspektrometria (MS) tömeganalízis képességét ötvözi. A folyadékkromatográfia elválasztási technika, és a töltött részecskék tömeg-töltés arányának elemzésére tömegspektrometriát alkalmazunk. A fizikai elválasztást általában HPLC-vel érik el, vagy alternatívaként az LCMS néven is ismert HPLC-MS. Az LCMS egy domináns analitikai technika ennek van nagyon nagy pontosság, érzékenység és specifitás összehasonlítva a HPLC-vel. Ezért számos alkalmazásban hasznos, például kutatási célokra, gyógyszeranalízishez, élelmiszer-elemzéshez stb. Az LCMS főként biokémiai tulajdonságok elválasztására, kimutatására, azonosítására és számszerűsítésére szolgál egy adott mintát komplex kémiai keverékek jelenlétében.
HPLC: A HPLC a nagy teljesítményű folyadékkromatográfia. Ez egy elválasztási technika, amelyet főként az összetevők elválasztására, az egyes összetevők azonosítására és mennyiségi meghatározására használnak a keverékben.
LCMS: Az LCMS jelentéseFolyadékkromatográfia és tömegspektrometria. Ez egy analitikai módszer, amely a folyadékkromatográfia fizikai elválasztási képességeit és a tömegspektrometria (MS) tömeganalízis képességét ötvözi..
HPLC: Ez csak folyadékkromatográfiás módszer.
LCMS: Ez a folyadékkromatográfiás módszer és a tömegspektrometria módszer kombinációja.
HPLC: Az LCMS-hez képest a HPLC elemzés kevésbé hatékony és lassú.
LCMS: A HPLC-hez képest az LCMS elemzése hatékony és gyors.
HPLC: Az LCMS-hez képest a HPLC elemzés kevésbé érzékeny.
LCMS: A HPLC-hez képest az LCMS elemzése érzékenyebb.
HPLC: Az LCMS-hez képest a HPLC elemzés kevésbé specifikus.
LCMS: A HPLC-hez képest az LCMS elemzése pontosabb.
HPLC: A HPLC kevésbé pontos eredményeket ad, mint az LCMS, néhány vegyi anyag meghatározására.
LCMS: Az LCMS pontosabb eredményeket ad, mint a HPLC, egyes vegyszerek meghatározására.
HPLC: A HPLC az LCMS komponensének tekinthető.
LCMS: Az LCMS nem tekinthető a HPLC komponensének.
HPLC: Ionforrás nem létezik a HPLC műszerben.
LCMS: Az ionforrás jelen van az LCMS műszerben.
HPLC: Az ionok, polimerek, szerves molekulák és biomolekulák HPLC alkalmazásával elemezhetők.
LCMS: A szerves molekulák és a biomolekulák elemezhetők. A HPLC-vel ellentétben az LCMS felhasználható a nem teljesen feloldott keverékek vizsgálatára.
HPLC: A HPLC műszer diagramját az 1. ábra mutatja, és rendszerint tartalmaz egy automatikus mintavevőt, szivattyúkat és egy detektorot. A mintavevő bevezeti a mintakeveréket a mozgófázisba (oldószerek, például víz, acetonitril és / vagy metanol nyomás alatt álló keveréke), amely azt az oszlopba továbbítja. A szivattyúk a mozgófázis kívánt áramlását és összetételét biztosítják az oszlopon. Az oszlop meg van töltve adszorbenssel, amely szemcsés szilárd részecske, például szilícium-dioxid vagy polimerek. Az érzékelő a minta alkotóelemeinek oszlopban jelenlévő mennyiségével arányos jelet bocsát ki, lehetővé téve a kiválasztott minta alkotóelemeinek számszerűsíthető elemzését. A HPLC műszer vezérelt, az adatok elemzését digitális mikroprocesszor és felhasználói szoftver biztosítja.
1.ábra: A HPLC készülék diagramja
LCMS: Az LCMS műszer diagramját a 2. ábra mutatja. A minta kivonatát behelyezzük a HPLC-vel ellátott oszlopba. Ez az oszlop megőrzi a minta metabolitjait fizikai karakter alapján, és a különböző metabolitok különböző időközönként áramlanak a tömegspektrométerbe. A tömegspektroszkópiát a részecskék tömegének felmérésére, a molekula elemi elrendezésének meghatározására és a molekula szerkezetének tisztázására használják. A mintát azonban ionizálni kell, hogy töltött molekulákat állítsanak elő, hogy meghatározzák tömeg-töltési arányukat. Ezért a HPLC-eszközök helyett az LCMS további három modult tartalmaz, mint például vasforrás, tömeg-elemző és detektor. Egy ionforrás képes a gázfázisú mintákat ionokká alakítani, és egy tömeg-elemző készüléket csoportosít az ionok tömegeik alapján elektromágneses mezők felhasználásával. Végül egy detektor mennyiségileg meghatározza a mintában lévő ionok értékeit és továbbítja azokat. Az LCMS technika kvalitatív és kvantitatív alkalmazásokra egyaránt alkalmazható.
2. ábra: Az LCMS eszköz diagramja
Összefoglalva: a HPLC folyadékkromatográfiás módszer, míg az LCMS a folyadékkromatográfia és a tömegspektrometria kombinációja. Mindkét elemzési módszer különböző tulajdonságokkal rendelkezik, de fel lehet használni az élelmiszer-összetétel, a gyógyszerkészítmény és más bioaktív molekulák azonosítására és mennyiségi meghatározására..
Hivatkozások Arpino, P. (1992). Kombinált folyadékkromatográfiás tömegspektrometria. III. Rész Hőpermet alkalmazások. Tömegspektrometria vélemények, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. és Spoendlin, C. (2004). Gyors fordított fázisú nagyteljesítményű folyadékkromatográfia gyakorlati szempontjai 3 μm-es részecskecsomagolt oszlopok és monolit oszlopok felhasználásával a gyógyszerfejlesztésben és a gyártásban, a jelenlegi helyes gyártási gyakorlat szerint. Journal of Chromatography, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. és Kerns, E. H. (1999). LC / MS alkalmazások a gyógyszerfejlesztésben. Tömegspektrometria vélemények, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). A mátrix által segített lézeres deszorpció / ionizáció csatolása a folyadék elválasztásokhoz. Tömegspektrometria vélemények 16 (5): 283. Kép jóvoltából: Az eredeti feltöltő „Hplc” -je Kjaergaard volt az en.wikipedia-n - Áthelyeztük az en.wikipedia-ból. (Public Domain) a Commonson keresztül