Különbség a nitrocellulóz és a nylon membrán között

Fő különbség - Nitrocellulóz vs Nylon membrán
 

A blotolás fontos módszer a DNS, RNS és fehérjék specifikus szekvenciáinak kimutatására ezek keverékeiből a molekuláris biológiában. Ezt egy blotnak nevezett membrán alkalmazásával végezzük. Különböző blotolási technikák léteznek, például északi, déli és nyugati blotolás. A blottoláshoz megfelelő membránt kell gondosan kiválasztani, hogy elkerüljük a nem specifikus kötődést és a helytelen kimutatásokat. A nitrocellulózt, a nejont és a PVDF-et gyakran használják membránokként blot-eljárásban. Különböző tulajdonságokkal rendelkeznek. A legfontosabb különbség a nitrocellulóz és a nejlon membrán között az A nitrocellulóz membránok magas fehérje immobilizálási potenciállal rendelkeznek mivel A nylon membránok magas nukleinsav-immobilizációs potenciállal rendelkeznek. Ugyanakkor mindkét típusú membránt gyakran alkalmazzák a blotolásban.

TARTALOMJEGYZÉK
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a nitrocellulóz membrán?
3. Mi a nylon membrán?
4. Side by Side összehasonlítás - Nitrocellulóz és Nylon membrán
5. Összegzés

Mi a nitrocellulóz membrán??

A nitrocellulóz-membrán a nukleinsav- és protein-blot-eljárásban általánosan használt membránszűrő. Magas fehérjekötő képességgel rendelkezik. Ezért a nitrocellulóz membránokat széles körben használják a Western blot eljárásban. A nitrocellulóz membránok kompatibilisek az összes hibridizációs technikával, és interferencia nélkül kiváló kötőképességet mutatnak. A nitrocellulóz membránok természetesen hidrofil természetűek. Hidrofil kölcsönhatást valósítanak meg a molekulákkal, és hatékonyan rögzítik azokat a membránon. A kereskedelemben kapható nitrocellulóz membránok két pórusméretben kaphatók: 0,45 és 0,2 um.

01. ábra: Western blotban használt nitrocellulóz membrán

Mi a nylon membrán??

A nejlonmembrán egy másik típusú kereskedelmi membrán, amelyet blottozási technikákban használnak. Alternatív megoldásként nitrocellulóz membránokkal használják déli és északi blotoláshoz. A nejlonmembránok ideálisak a déli blotoláshoz, mint a nitrocellulóz, mivel nagy affinitással bírnak a DNS-hez kötődni. A nylon membránok számos egyedi tulajdonsága miatt a kutatók általában a nitrocellulóz membrán helyett a nylon membránokat használják déli és északi blottoláshoz. A nitrocellulóztól eltérően a nejlonmembránokat is ajánljuk a sztrippeléshez és az újjászaporodáshoz.

02 ábra: A déli blotoláshoz használt nejlonmembrán

Mi a különbség a nitrocellulóz és a nylon membrán között??

Nitrocellulóz vs Nylon membrán
A nitrocellulóz membránok törékenyek.	A nylon membránok kevésbé törékenyek.
Kezelése
Ezek nehéz kezelni.	Könnyen kezelhetők.
Reprobing
A nem támogatott nitrocellulóz membránokat nehéz megjavítani.	A nejlon membránokkal könnyű a reproblikálás.
Kompatibilitás a különféle tárolási feltételekkel
A nitrocellulóz membránok kevesebb szilárdsággal bírják a különféle tárolási körülményeket.	A nylon membránok robusztusabban reagálnak a különféle tárolási körülményekre.
Használat
Előmelegítés szükséges.	A nylon membránokhoz nem szükséges előmelegítés.
Hidrofil természet
A nitrocellulóz membránok hidrofil jellegűek, de kevésbé hidrofilek, mint a nejlon membránok.	Ezek természetüknél fogva erősen hidrofil.
Immobilizációs potenciál
A nitrocellulóz membránok kisebb affinitással rendelkeznek a nukleinsavakkal szemben. De nagy affinitással rendelkezik a fehérjékkel szemben.	A nylon membránok nagy kötőképességet mutatnak a nukleinsavakkal, mint a nitrocellulóz membránok.

Összegzés - Nitrocellulóz vs Nylon membrán

A nitrocellulóz és a nejlon membránok speciális lapok, amelyeket blotolásban használnak a gél sávos mintájának reprodukálására. Lehetővé teszik egy adott szekvencia vagy fehérje kimutatását a keverékekből, a membránon való rögzítésükkel. Miután a molekulák a membránon immobilizálódtak, felhasználható szubsztrátumként a jelölt próbákkal végzett hibridizációs elemzéshez. A nitrocellulóz membránt általában a fehérjék kimutatására használják Western-blot technikában, mivel a fehérjékkel nagyon kötődnek. A nylon membránokat gyakran használják déli és északi blotoláshoz. Ez a különbség a nitrocellulóz és a nylon membrán között.

Irodalom:
1. Hayes, P. C., C. R. Wolf és J. D. Hayes. "Blotteléses technikák a DNS, RNS és fehérjék vizsgálatához." BMJ: British Medical Journal. Amerikai Egyesült Államok Nemzeti Orvostudományi Könyvtára, 1989. október 14. Web. 2017. április 7
2. Mahmood, Tahrin és Ping-Chang Yang. “Western blot: technika, elmélet és hibaelhárítás.” North American Journal of Medical Sciences. Medknow Publications & Media Pvt Ltd, 2012. szeptember. Web. 2017. április 7

Kép jóvoltából:
1. „Western blot transzfer” Bensaccount által az angol Wikipedia-ban (CC BY 3.0) a Commons Wikimedia segítségével