A ribonukleázok olyan nukleázok, amelyek specifikusan lebontják az RNS-t kisebb egységekre. Két kategóriába sorolhatók; endoribonukleázok és exoribonukleázok. Az endoribonukleáz egy endonukleáz, amely elbonthatja az egyszálú vagy a kétszálú RNS-t. Ez hasítja a foszfodiészter kötéseket egy RNS polinukleotid láncon belül. A példák az RNáz A, RNáz III, RNáz T1, RNáz P és RNáz H. Az exoribonukleáz egy exonukleáz, amely lebontja az RNS-t azáltal, hogy az RNS molekula 5'-vagy 3'-végéből terminális nukleotidokat távolít el. A példák az RNáz R, RNáz II, RNáz D és RNáz PH. Az kulcs különbség az A RNASE és a H RNASE között az, hogy Az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely specifikusan lebontja az egyszálú RNS-t kisebb összetevőkre, míg az RNáz H egy nem-specifikus enzim, amely a hidrolitikus mechanizmuson keresztül az RNS-DNS-hibridben lévő RNS-t kisebb egységekre hasítja.
1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi az A RNASE?
3. Mi az RNASE H?
4. hasonlóságok az RNASE A és az RNASE H között
5. Összehasonlítás - RNASE A és RNASE H táblázatos formában
6. Összegzés
Az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely specifikusan hasítja a páratlan citozin- és uracilmaradványokat az egyszálú RNS 3'-végén. Az RNáz H magasabb sókoncentrációban működik (0,3 M vagy magasabb NaCl koncentráció). A hidrolitikus reakció két lépésből áll. 3 'foszforilált terméket képez 2', 3 'gyűrűs monofoszfát közbenső termékkel. Bár magasabb az egyszálú RNS-re specifikus a magasabb sókoncentrációban, képes kettős szálú RNS-t és RNS-t is lebontani az RNS-DNS hibridben alacsonyabb NaCl-koncentrációnál (kevesebb mint 0,3M NaCl).
Bruce Merrifield először szintetizálta ezt az enzimet. Az RNáz A nagyon népszerű enzim a molekuláris kutatásban. A szarvasmarha hasnyálmirigy RNáz A az RNáz A. példája. És ez az egyik legkeményebb enzim, amelyet a laboratóriumban használnak. Ennek az enzimnek aktivitásához nincs szükség kofaktorra. Nagyon hőstabil enzim. Az RNáz A az első enzim és a harmadik protein, amelyben helyes aminosav-szekvenciát detektáltak. Ez az enzim nagyon kicsi, 124 aminosavval és 12600 da molekulatömeggel rendelkezik. És négy hisztidin maradékot tartalmaz (His 12 és His 119, amelyek katalitikus reakcióban vesznek részt).
01. ábra: Az RNáz A
Az RNáz A nyers minta forrásával izolálható. Forralás közben az összes többi enzim lebontja a fennmaradó RNáz A-t. Az RNáz A egy elképesztően stabil enzim. Ez az enzim a ribonukleáz gátló fehérjékkel, a nehézfémekkel és az uridin-vanadát-komplexekkel gátolja.
Az RNáz H egy nem-specifikus ribonukleáz enzim, amely hidrolitikus reakció révén képes RNS-t lebontani az RNS-DNS hibridben. Az RNáz H hasítja az RNS 3'-O-P kötését egy RNS-DNS hibridben. Végül 3'OH és 5 'foszfáttal végződött termékeket állít elő. A DNS replikációban kulcsszerepet játszik azáltal, hogy új DNS-szálak kialakulása után eltávolítja az RNS primerjét. Laboratóriumi körülmények között specifikusan lebontja az RNS-t az RNS-DNS hibridben, de nem a DNS-t és a nem hibridizált RNS-t. És ezt az enzimet általában az RNS templát megsemmisítésére használják, miután az első komplementer DNS-szál kialakult a cDNS szintézise során.
02 ábra: RNáz H
Az RNase H nukleáz-védelmi vizsgálatokban is használható. Beépíthető a poli-A farok eltávolításához az mRNS-ből. Az RNáz H képes megsemmisíteni a nem kódoló RNS-t a sejtben és azon kívül. A fémionoknak szükségük van kofaktorként e protein aktivitáshoz. A kelátképző (EDTA) felhasználható az RNáz H enzim gátlására.
A RNASE vs. RNASE H | |
Az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely magasabb sókoncentrációban specifikusan hasítja az egyszálú RNS páratlan citozin- és uracilmaradványainak 3'-végét. | Az RNáz H egy nem-specifikus ribonukleáz enzim, amely hidrolitikus reakció révén képes RNS-t lebontani az RNS-DNS hibridben. |
Az RNS hasadás jellege | |
Az RNáz A specifikusabban hasítja az egyszálú RNS-t nagyobb sókoncentráció mellett. | Az RNáz H hasítja az RNS-t az RNS-DNS hibridben. |
A tevékenység társfaktorának szükségessége | |
Az RNase A tevékenységéhez nincs szükség kofaktorokra. | Az RNase H-nak fémionokra van szüksége kofaktorokként a tevékenységéhez. |
A fehérjeaktivitás gátlói | |
A ribonukleáz inhibitor fehérje, nehézfém és uridin vanadát komplexek gátolják az RNSáz A aktivitást. | A kelátképző (EDTA) gátolja az RNáz H aktivitást. |
RNS primer eltávolítása a DNS replikációban | |
Az RNáz A nem használható az RNS primer eltávolításához a DNS replikációban. | Az RNáz H-t használják az RNS primer eltávolításához a DNS replikációban |
DNS-sablon eltávolítása komplementer DNS (C-DNS) szintézisben | |
Az RNáz A nem használható az RNS templát eltávolításához a komplementer DNS (C-DNS) szintézis során. | Az RNáz H-t használják az RNS templát eltávolítására a komplementer DNS (C-DNS) szintézis során. |
A Poly-A-farok eltávolítása az Oligo-val hibridizált mRNS-ben (dt) | |
Az RNáz A-t nem használják a „poli-A farok” eltávolítására oligo-val hibridizált mRNS-ben (dt). | Az RNáz H-t az oligóval hibridizált mRNS „poli-A farok” eltávolítására használják (dt) |
A ribonukleázok olyan nukleáz enzimek, amelyek képesek az RNS-t kisebb egységekre hasítani. Kétféle; endoribonukleázok és exoribonukleázok. Az endoribonukleáz egy endonukleáz, amely képes egyszálú vagy kétszálú RNS-t lebontani. És lehasítja a foszfodiészter kötést egy RNS polinukleotid láncon belül. Az RNáz A és az RNáz H két endoribonukleáz. Az RNáz A egy hasnyálmirigy ribonukleáz, amely specifikusan hasítja a páratlan citozin- és uracilmaradványokat az egyszálú RNS 3'-végén, magasabb sókoncentráció mellett. Az RNáz H egy nem-specifikus ribonukleáz enzim, amely hidrolitikus reakció révén képes RNS-t lebontani az RNS-DNS hibridben. Ez a különbség az RNáz A és az RNáz H között.
Letöltheti e cikk PDF verzióját, és offline célokra felhasználhatja, az idézet megjegyzésének megfelelően. Töltse le itt a PDF verziót. Az RNASE A és az RNASE H eltérése
1.Karuturi, Amrutha szerző. “17 tudnia kell az RNase A tényeit.” AG Blog, 2017. február 22. Elérhető itt
2. „ribonukleáz.” Wikipedia, Wikimedia Alapítvány, 2018. január 5. Elérhető itt
1.'RNase A'By Nem érhető el géppel olvasható szerző. Vossman feltételezte (szerzői jogi igények alapján)., (CC BY-SA 2.5) a Commons Wikimedia segítségével
2.'RNase H fix'By Nem áll rendelkezésre géppel olvasható szerző. Vossman feltételezte (szerzői jogi igények alapján)., (CC BY-SA 2.5) a Commons Wikimedia segítségével