Különbség a egymásra helyezett gél és az elválasztó gél között

Legfontosabb különbség - Összerakó gél vs elválasztás Gél
 

Az egymásra helyezett gél és az elválasztó gél kifejezéseket az SDS-PAGE technika magyarázatához használjuk. Az SDS-PAGE vagy nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid gél elektroforézis laboratóriumi technika, amelyet a fehérjemolekulák molekulatömegük alapján történő elválasztására használnak. A technika mögött meghúzódó elmélet az, hogy a különböző molekulatömegű proteinek eltérő migrációs sebességet mutatnak; az alacsony molekulatömegű molekulák gyorsabban vándorolnak, míg a nagy molekulatömegű molekulák lassan vándorolnak. A migrációs közeg gél. Kétféle gél létezik: egymásra rakódó és elválasztó gél. Az kulcs különbség az egymásra helyezett gél és az elválasztó gél között ez az az egymásra helyezett gél pH-ja 6,8, míg az elválasztó gél pH-ja 8,8.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség
2. Mi a záró gél?
3. Mi az elválasztó gél?
4. A kapcsolati gél és az elválasztó gél közötti kapcsolat
5. Összehasonlítás egymással - Összerakó gél vs elválasztó gél táblázatos formában
6. Összegzés

Mi a Stacking Gel??

A egymásra rakódó gél alacsony koncentrációjú poliakrilamid gél, amelyet az SDS-PAGE technika alkalmazásával az koncentráltabb felbontógél (elválasztó gél) tetejére helyeznek. A halmozó gélt az elektroforézis felbontásának javítására használják. A felbontás növekszik a mintában levő proteinekre ható egymásra helyezett gél és a feloldó gél koncentrációja közötti különbség miatt. Mivel a poliakrilamid koncentrációja az egymásra helyezett gélben alacsony, a pórusméret nagyobb. Ez a szétválasztás fokozásában is segít.

A halmozó gél laza poliakrilamid gél, nagy pórusai körülbelül 7% poliakril-amid. Ezek a pórusok nem jelentik jelentős akadályt a nagy fehérjemolekulák számára. Ezért ez a gél kissé befolyásolja ezen fehérjék mobilitását. Ez elválasztja a fehérjék mobilitása és mérete alapján azáltal, hogy két gél között koncentrálják őket.

01. ábra: SDS-PAGE akril-amid gél

A halmozó gél pH-ja 6,8. PH-ja savas, mint a 2 pH-egységben feloldódó gélé. Ez a pH alacsonyabb ionerősséget jelent, ennélfogva nagyobb az elektromos ellenállás. Ez provokálja a fehérjék mobilitását, mint a gélben lévő többi töltött részecske.

Mi az elválasztó gél??

Az SDS-PAGEtechnique elválasztó vagy rezolváló géle egy erősen koncentrált poliakril-amid gél, amelyet az alacsony koncentrátumú egymásra helyezett gél tetejére helyeznek. Az elválasztó gél nagy mennyiségben (10%) poliakrilamidot tartalmaz. Ennek a gélnek a pH-ját 8,8-nál tartjuk, ami magasabb pH-érték, mint a halmozó gélé.

02 ábra: Gél elektroforézis készülék

Amikor a fehérjemolekulák elérték az elválasztó gélt, ezen molekulák migrációja lelassul, mivel az elválasztó gél nagy koncentrációjú gél, kis pórusmérettel, amely jelentős akadályt jelenthet a fehérjemolekulák mozgása szempontjából. Ez a lassulás lehetővé teszi, hogy a többi fehérje lassan vándoroljon felzárkóztatáshoz, szűk, koncentrált sávot eredményezve a két gél között.

Milyen kapcsolat van a egymásra helyezett gél és az elválasztó gél között??

• Ugyanabban a készülékben mind a kötegelő gél, mind az elválasztó gél típusa van.

Mi a különbség a egymásra helyezett gél és az elválasztó gél között??

Halmozó gél vs elválasztó gél
A egymásra rakódó gél alacsony koncentrációjú poliakrilamid gél, amelyet az SDS-PAGE technikával az koncentráltabb felbontó gél (elválasztó gél) tetejére helyeznek..	Az SDS-PAGE technika elválasztó vagy rezolváló géle egy erősen koncentrált poliakrilamid gél, amelyet egy alacsony koncentrációjú egymásra rakódó gél tetejére helyeznek.
Elhelyezés
Az egymásra rakódó gélt az elválasztó (elválasztó) gélre helyezzük.	Az elválasztó gélt a gél elektroforéziséhez használt tartály aljára helyezzük.
koncentráció
A halmozó gél koncentrációja magas.	Az elválasztó gél koncentrációja alacsony.
Poliakrilamid tartalom
A egymásra helyezett gél körülbelül 7% poliakrilamidot tartalmaz.	Az elválasztó gél körülbelül 10% poliakrilamidot tartalmaz.
pH
A halmozó gél pH-ja 6,8.	Az elválasztó gél pH-ja 8,8.
Pórusméret
A pórusgél nagy pórusmérettel rendelkezik.	Az elválasztó gélben kis pórusméretek vannak jelen.
Felbontás
A halmozott gél jobb felbontást biztosít.	Az elválasztó gél gyenge felbontást ad.

összefoglalás - Halmozó gél vs elválasztó Gél

Az egymásra helyezett gél és az elválasztó gél kétféle poliakril-amid gél, amelyeket az adott mintában a fehérjemolekulák jobb elválasztására használnak. Az egymásra helyezett gél és az elválasztó gél közötti különbség az, hogy a egymásra helyezett gél pH-ja 6,8, míg az elválasztó gél pH-ja 8,8.

Referencia:

1. „Poliakrilamid gél elektroforézis.” Poliakrilamid gél elektroforézis (elmélet): Molekuláris Biológia Virtuális Lab II: Biotechnológia és orvosbiológiai technika: Amrita Vishwa Vidyapeetham Virtual Lab. Itt érhető el  
2. „Hogyan működik az SDS-PAGE” Bitesize Bio, 2018. február 16. Elérhető itt
3. “SDS-PAGE halmozó gél - BICH 608 (Polymenis-Pettigrew).” Google Webhelyek. Itt érhető el 

Kép jóvoltából:

1.'SDS-PAGE akril-amid gél'By Bensaccount az angol Wikipedia-ban, (CC BY 3.0) a Commons Wikimedia segítségével  
2. „Gélelektroforézis-készülék” Jeffrey M. Vinocur - Saját munkája, (CC-BY 2.5) a Commons Wikimedia segítségével