SDS PAGE vs gél elektroforézis
Az elektroforézis felhasználható egy tárgy tömegének meghatározására, általában fehérje és dezoxiribonukleinsav (DNS) szempontjából. A DNS-szál, ha vegyszerekbe juttatják, felgyorsíthatja vagy lelassíthatja az információs folyamatot. Az ismert tömegű DNS-markereket használják az objektumok méretének megközelítésére, ha az elektroforézis véget ért. Az elektroforézis valószínűleg a leggyakrabban használt eszköz a molekuláris biológusok és biokémikusok számára.
Kétféle elektroforézis létezik, amelyeket általában használnak ebben a folyamatban. Ezek nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid-gél elektroforézis (SDS-PAGE) és natív gél-elektroforézis.
Az SDS-PAGE nem-szelektív gél-elektroforézis módszer, amelyet például a biokémia, a kriminalisztika, a biológia és a genetika területén alkalmaznak, hogy elválaszthassák a fehérjéket az elektroforetikus mobilitásuktól. Az SDS egy anionos felületaktív anyag, amely felhasználható a sejtek lizálására a DNS extrakció során és a fehérjék SDS-PAGE-ban történő elválasztására. Az elektroforézis során a fehérje keverékét először cseppfolyósítják SDS oldatban. Ezután a Mercaptoeetanol nevű anyagot felvisszük a diszulfidkötések eltávolítására, hogy a fehérje lineáris legyen. Ezután elektroforézist indítunk. Az eredmények két molekulamaradékot eredményeznek, amelyek közül az egyik SDS-PAGE.
Az SDS-PAGE hiánya nem kérdés, mivel a gélelektroforézis csak akkor végezhető el, ha a fehérjék nem veszítik el teljes másodlagos és harmadlagos szerkezetüket, és nem nyílnak általában egyenes rudakba.
Eközben a natív gélelektroforézis gélt alkalmaz antikonvektív közegként. Általában biológiai makromolekulák, például DNS, ribonukleinsav (RNS) és fehérje elválasztására használják. Használható nanorészecskék elválasztására is.
A natív gélelektroforézisben két fő gél van, nevezetesen:
Agaróz gél, amelyet nagyobb molekulákhoz használnak. Ez a gél nem azonosítja a két molekuláris sáv közötti kis különbségeket. Kizárólag a DNS elválasztására használják. Az agarózgél megjelenítését az etidium-bromid keverékével végezzük.
Poliakrilamid gél, amelyet kisebb molekulákhoz használnak. Ez a gél azonosítja a molekuláris sávok közötti különbségeket. A DNS mellett a fehérjéket is elválaszthatja.
Összefoglaló:
1. Az SDS-PAGE nem-szelektív gélelektroforézis módszer, amelyet például a biokémiai, kriminalisztikai, biológiai és genetikai területeken alkalmaznak a fehérjék leválasztására az elektroforézis mobilitásáról, míg a gélelektroforézist általában a biológiai makromolekulák, például a DNS elválasztására használják. ribonukleinsav (RNS) és fehérje. Használható nanorészecskék elválasztására is.
2.A natív gélelektroforézisnek két típusa van, nevezetesen: agarózgél és poliakrilamidgél.